菌株15對甜瓜根腐病和西瓜枯萎病的防效_王麗麗.pdf

116 2021 年 第 62 卷第 1 期 收 稿日期 2020 11 07 基金項目 寧波市科技富民項目 2017C10007 作者簡介 王麗麗 1987 女 浙 江紹興人 農(nóng)藝師 碩士 從事土壤肥料與微生物研究 E mail wanglili531 163 com 文獻著錄格式 王麗麗 朱詩君 金樹權 菌株 15 對甜瓜根腐病和西瓜枯萎病的防效 J 浙江農(nóng)業(yè)科學 2021 62 1 116 118 DOI 10 16178 j issn 0528 9017 20210139 菌 株 15 對甜瓜根腐病和西瓜枯萎病的防效 王 麗麗 朱詩君 金樹權 寧波市農(nóng)業(yè)科學研究院 浙 江 寧波 315040 摘 要 為 了研究菌株 15 對土傳病害的拮抗效果 以甜瓜根腐病和西瓜枯萎病為靶標病害 研究菌株 15 對其防治作用 結果表明 菌株 15 在室內能抑制甜瓜根腐病和西瓜枯萎病病原菌 室外對這 2 種病害也有一定 的防控效果 灌菌次數(shù)越多 防效越好 最高防效分別達 41 2 和 42 3 關鍵詞 菌株 15 芽孢桿菌 拮抗菌 甜瓜根腐病 西瓜枯萎病 防效 中圖分類號 S144 9 文獻標志碼 B 文章編號 0528 9017 2021 01 0116 03 甜瓜根腐病是由真菌半知菌亞門瓜類腐皮鐮孢 菌 1 侵 染植株而引起的土傳病害 是甜瓜生產(chǎn)上 的常見病害 西瓜枯萎病是由真菌鐮孢屬引起的土 傳病害 在各地發(fā)生均較為嚴重 在重茬地發(fā)病率 為 30 以上 嚴重地塊可達到 80 以上 甚至造 成絕產(chǎn) 2 是 西瓜生產(chǎn)中危害最為嚴重的病害之 一 甜瓜根腐病和西瓜枯萎病病原菌均可長期在土 壤中存活 因此 防治十分困難 利用 1 種或多種微生物來抑制病原菌生命活力 和繁殖能力的方法稱之為生物防治 其中利用拮抗 菌株防治土傳病害是生物防治的重要研究方向 也 是農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的主要防治措施之一 路曉萌 等 3 從甜瓜根際土壤中篩選得到 2 株根腐病拮抗菌 F22 和 T5b 這 兩株菌株對瓜類腐皮鐮孢菌均有較 好的拮抗效果 岳菊等 4 篩選得到的枯草芽孢桿 菌對真菌鐮孢屬菌絲生長的抑制作用較為明顯 且 對 西瓜枯萎病的田間防控效果較好 葛慈斌等 5 篩選出的枯草芽孢桿菌對真菌鐮孢屬的抑制作用很 明 顯 室內抑制效果能達到 80 6 孫立軍等 6 從 中藥植物金銀花的組織中分離到 1 株具有廣譜抗 菌活性的多粘芽孢桿菌 對真菌鐮孢屬具有很強的 抑制作用 對田間防治西瓜枯萎病有一定的效果 本研究對實驗室之前篩選分離到的 1 株具有拮 抗作用的芽孢桿菌菌株 15 進行深入研究 研究其 對其他土傳病害 甜瓜根腐病 西瓜枯萎病 的 室內和田間防控效果 為菌株 15 的更廣泛應用提 供技術支持 1 材料與方法 1 1 供試菌株和培養(yǎng)基 菌株 15 為實驗室前期從黃瓜枯萎病發(fā)病嚴重 地區(qū)的健康土壤中分離到的 1 株芽胞桿菌 甜瓜根 腐病病原菌和西瓜枯萎病病原菌來自寧波市農(nóng)科院 蔬菜研究所 PDA 培養(yǎng)基 20 馬鈴薯浸出液 1 000 mL 200 g 馬鈴薯煮沸騰 15 min 定容至 1 000 mL 蔗糖 20 g 瓊脂 20 g 121 下滅菌 20 min 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 牛肉膏 5 g 蛋白胨 10 g 氯化鈉 5 g 自來水 1 000 mL pH 值為 7 2 7 4 121 滅菌 20 min 1 2 菌株 15 對甜瓜根腐病病原菌和西瓜枯萎病病 原菌的室內拮抗效果 將甜瓜根腐病和西瓜枯萎病病原菌活化 然后 用打孔器打取直徑 6 mm 的菌苔置于平板中央 于 28 下培養(yǎng) 2 d 將菌株 15 菌落點接于病原菌菌 片周圍 以單獨接種病原菌菌苔的平板作為對照 于 28 恒溫培養(yǎng) 3 d 觀察病原菌生長情況及有無 抑菌圈出現(xiàn) 挑取拮抗效果好的菌株進行純化 將 純化后的菌株連續(xù)多次進行平板對峙試驗 觀察其 抑菌效果 1 3 菌株 15 對甜瓜根腐病的田間防控效果 田間試驗在寧波市鄞州區(qū)寧波市農(nóng)業(yè)科學研究 院東錢湖基地內進行 試驗材料為菌株 15 發(fā)酵液 王 麗麗 等 菌株 15 對甜瓜根腐病和西瓜枯萎病的防效 117 試 驗設置 1 0 10 6 T1 1 0 10 7 T2 1 0 10 8 T3 1 0 10 9 T4 mL 1 4 個 濃度梯度 于甜瓜移栽后 50 d 開始施用菌株 15 的發(fā)酵液 每 隔 7 d 施用 1 次 共計 3 次 每株甜瓜澆灌 10 mL 每處理 3 次重復 以施用等量清水為對照 病情調查 甜瓜根腐病病情指數(shù)考查甜瓜根腐 病 分為 5 個級別 0 級 全株無病 外部無癥 狀 1 級 全株葉片總數(shù)的 1 4 以下葉片發(fā)病 或 莖內維管束 1 4 以下變褐色 2 級 全株葉片總數(shù) 的 1 4 1 2 葉片發(fā)病 或莖內維管束 1 4 1 2 變 褐色 3 級 全株葉片總數(shù)的 1 2 以上葉片發(fā)病 或莖內維管束 3 4 以上變褐色 4 級 整株因病枯 死 計算病情指數(shù)和防治效果 1 4 菌株 15 對西瓜枯萎病的田間防控效果 田間試驗在寧波市鄞州區(qū)寧波市農(nóng)業(yè)科學研究 院東錢湖基地內進行 試驗材料為菌株 15 發(fā)酵液 試驗設置 1 0 10 6 T1 1 0 10 7 T2 1 0 10 8 T3 1 0 10 9 T4 mL 1 4 個 濃度梯度 于西瓜出苗后 10 d 開始施用拮抗菌株的發(fā)酵液 每隔 7 d 施用 1 次 共計 3 次 每株西瓜苗澆灌 10 mL 每處理重復 3 次 以施用等量清水為對照 病情調查 西瓜枯萎病發(fā)病程度分為 5 個級 別 0 級 植株正常生長 1 級 葉片或莖蔓萎焉 萎焉面積由下而上占全株的 1 4 或不到 1 4 2 級 葉片或莖蔓萎焉 萎焉面積由下而上占全株的 1 2 莖蔓上有樹脂狀琥珀色黏液 3 級 葉片或莖 蔓萎焉 萎焉面積由下而上占全株的 3 4 莖蔓上 有樹脂狀琥珀色黏液 4 級 全株萎焉死亡 計算 病情指數(shù)和防治效果 1 5 數(shù)據(jù)分析 采用 DPS 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 2 結果與分析 2 1 菌株 15 對甜瓜根腐病和西瓜枯萎病的室內拮 抗效果 由圖 1 可知 菌株 15 對甜瓜根腐病和西瓜枯 萎病病原菌均具有一定的拮抗性 在平板上有一定 的拮抗圈 2 2 菌株 15 對甜瓜根腐病的生物防效 由表 1 可知 隨著菌株 15 發(fā)酵液濃度的增加 對甜瓜根腐病的防效增高 隨著灌根次數(shù)的增多 其 防效也越好 灌根 3 次后 T4 的防效最好 但與 T2 T3 無顯著差異 顯著高于 T1 因此 推薦濃度為 T2 T4 其 3 次灌菌后的防效為 32 3 41 2 圖 1 菌 株 15 的室內拮抗效果 表 1 菌株 15 發(fā)酵液對甜瓜根腐病的田間防效 濃 度 處 理 1 次 灌菌后 2 次 灌菌后 3 次灌菌后 病指 防效 病指 防效 病指 防效 T1 0 32 15 5 b 0 37 24 9 b 0 41 28 2 b T2 0 31 17 8 ab 0 34 30 1 b 0 38 32 3 ab T3 0 29 22 3 ab 0 33 33 6 ab 0 36 36 7 ab T4 0 28 24 4 a 0 31 36 8 a 0 33 41 2 a CK 0 38 0 0 49 0 0 58 0 注 同列數(shù)據(jù)后無相同小寫字母 表示組間差異顯著 P 0 05 表 2 同 2 3 菌 株 15 對西瓜枯萎病的生物防效 由表 2 可知 隨著菌株 15 發(fā)酵液濃度的增加 菌株 15 對西瓜枯萎病的防效增高 隨著灌根次數(shù) 的增多 其防效也越高 灌根 3 次后 T4 處理的 防效最好 與 T3 無顯著差異 與 T1 T2 差異顯 著 因此 推薦菌株 15 發(fā)酵液濃度為 T3 T4 其 3 次灌菌后的防治效果為 35 8 42 3 表 2 菌株 15 發(fā)酵液對西瓜枯萎病的田間防效 濃 度 處 理 1 次 灌菌后 2 次 灌菌后 3 次灌菌后 病指 防效 病指 防效 病指 防效 T1 0 31 13 8 a 0 37 21 2 c 0 38 28 5 b T2 0 28 21 0 a 0 34 26 7 bc 0 35 33 3 b T3 0 28 23 2 a 0 33 30 1 ab 0 33 35 8 ab T4 0 27 25 6 a 0 30 35 7 a 0 30 42 3 a CK 0 36 0 0 50 0 0 50 0 3 小 結與討論 土傳病害是發(fā)生在植株根部或莖部且以土壤為 媒介進行傳播病害的統(tǒng)稱 7 一 般包括根腐病 枯萎病 猝倒病 立枯病 疫病 黃萎病等病害種 類 土傳病害的病原菌的生活史一部分或者大部分 在土壤中完成 在條件適宜時病原菌萌發(fā) 并且侵 染植株根部或莖部導致植株發(fā)生病害 8 近 年來 由于化肥的大量施用 不但造成土壤肥力嚴重下降 和化肥的超量 還導致土壤微生物區(qū)系紊亂 使得 118 2021 年 第 62 卷第 1 期 農(nóng)作物土傳病害逐年加重 這給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶來巨大 經(jīng) 濟損失 嚴重制約著農(nóng)業(yè)生產(chǎn)發(fā)展 9 化學藥劑在防治植株土傳病害上發(fā)揮著重要作 用 但化學藥劑存在很多弊端 首 先 化學藥劑大 量應用引起藥物殘留 導致環(huán)境污染 其次 化學 藥劑大量使用還會導致病原微生物產(chǎn)生抗藥性 使 得防治工作更加困難 10 12 利用拮抗細菌防治植 株土傳病害具有成本低 環(huán)境友好和無藥物殘留等 特 點 具有廣闊的應用前景 13 15 本 試驗通過菌株 15 對甜瓜根腐病 西瓜枯萎 病的室內和田間防控效果研究表明 菌株 15 室內 能拮抗甜瓜根腐病和西瓜枯萎病病原菌 田間對這 兩種病害也有一定的防控效果 且灌菌次數(shù)越多 防治效果也越好 最高防效分別可達 41 2 和 42 3 菌株 15 對根腐病和枯萎病的生防機理有 待進一步研究 參 考文獻 1 李 金玉 甜瓜抗病基因同源序列的克隆與序列分析 D 烏魯木齊 新疆大學 2006 2 徐偉慧 周巖 吳鳳芝 西瓜枯萎病的研究進展 J 中國 蔬菜 2013 8 4 11 3 路 曉萌 姚良同 趙麗明 等 三株甜瓜拮抗細菌的篩選 與鑒定 J 生物技術通報 2010 5 111 115 4 岳 菊 劉郵洲 張榮勝 等 西瓜枯萎菌拮抗細菌的篩選 鑒定及防效測定 J 中國生物防治學報 2011 27 3 428 432 5 葛 慈斌 劉波 朱育菁 等 生防菌 NH BS 2000 對西瓜枯 萎病原菌抑制作用的研究 J 廈門大學學報 自然科學 版 2004 43 S1 87 90 6 孫 力軍 陸兆新 別小妹 等 1 株抗菌植物內生菌 EJH 2 菌株的分離和鑒定 J 中國微生態(tài)學雜志 2006 18 1 23 26 7 徐 美娜 王光華 靳學慧 土傳病害生物防治研究進展 J 吉林農(nóng)業(yè)科學 2005 30 2 39 42 8 李 世東 繆作清 高衛(wèi)東 我國農(nóng)林園藝作物土傳病害發(fā) 生和防治現(xiàn)狀及對策分析 J 中國生物防治學報 2011 27 4 433 440 9 李 洪連 黃俊麗 袁紅霞 有機改良劑在防治植物土傳病 害中的應用 J 植物病理學報 2002 32 4 289 295 10 ZAKI K MISAGHI I J HEYDA I A et al Control of cotton seedling damping off in the field by Burkholderia Pseudomonas cepacia J Plant Disease 1998 82 3 291 293 11 HEYDA I A MISAGHI I J Biocontrol activity of Burkholderiacepacia against hizoctoniasolani in herbicide treated soils J Plant and Soil 1998 202 1 109 116 12 HEYDA I A MISAGHI I J The role of rhizosphere bacteria in herbicide mediated increase in hizoctoniasolani induced cotton seedling damping off J Plant and Soil 2003 257 2 391 396 13 CHA UDATTAN Biological control of weeds by means of plant pathogens Significance for integrated weed management in modern agro ecology J Biocontrol 2001 46 2 229 260 14 BOTELHO G MENDON A HAGLE L C Fluorescent Pseudomonads associated with the rhizosphere of crops an overview J Brazilian Journal of Microbiology 2006 37 4 401 416 15 Abo Elyousr K A M Hashem M AliE H Integrated control of cotton root disease by mixing fungal bio control agents and resistance inducers J Crop Protection 2009 28 4 295 301 責 任編輯 張瑞麟