蝴蝶蘭_火鳳凰_組織培養(yǎng)關鍵技術研究.pdf

2022年13期 智慧農業(yè)導刊 JournalofSmartAgriculture 試驗 研究 蝴蝶蘭 火鳳凰 組織培養(yǎng)關鍵技術研究 曾燕紅1 玉新愛2 蘇榮軍1 1 廣西玉林農業(yè)學校 廣西玉林 537000 2 玉林市農業(yè)科學院 廣西玉林 537000 蝴蝶蘭屬蘭科蝴蝶蘭屬 花體輕盈美麗 花形奇 特 花色艷麗 花期長 被稱為 洋蘭皇后 圖 1 由于 其觀賞和經(jīng)濟價值高 深受國內外花卉市場的青睞 蝴 蝶蘭屬單莖氣生蘭 極少數(shù)側枝 所以 在大規(guī)模生產(chǎn) 中 采用分株繁殖是非常困難的 此外 由于大部分的 種子尚未完全成熟 而且種子中沒有胚乳 因此發(fā)芽速 度較慢 難以通過播種技術進行有性生殖 組織培養(yǎng)技 術具有快速的生長速度和較高的繁殖能力 具有年生 產(chǎn)能力高的優(yōu)點 是目前工廠式育苗的主要技術途徑 目前 國內外關于蝴蝶蘭的組培技術已較為成熟 但由 于品種之間的誘導率差異大 增 殖 系 數(shù) 低 植物生長調 節(jié)劑的種類和濃度比例不確定等原因 其技術水平也 有差異 所以 開發(fā)適合于特殊品種的組培快繁技術系 統(tǒng)具有十分重要的現(xiàn)實意義 因此 本文選擇了蝴蝶蘭 火鳳凰 的莖稈作為實驗材料 通過對蝴蝶蘭 火鳳 凰 的 不定芽誘導 增 殖和生根等各個階段的影響進行 了研究 確定了 火鳳凰 組培快繁的最佳培養(yǎng)條件 使 其快速繁殖技術系統(tǒng)得到優(yōu)化 為其工業(yè)化 規(guī)?；?產(chǎn)提供技術支撐 1 1 材料和方法 1 1 試驗材料 加入不同比例的植物生長調節(jié)劑 用 8 00g L的瓊 脂對所有的載體進行了固化 并且在25g L的蔗糖和 5 6 的 pH值下進行了固化 加入0 50g L的活性碳 AC 以防爆炸褐化 然后在121 下進行30min的殺 菌 如圖2所示 1 2 材料選擇和滅菌 開花期間 從花卉市場購買蝴蝶蘭 火鳳凰 應 選 擇生長旺盛 無病蟲害 無變異的母株為外植體 在收集 前對外植體進行預處理 在收獲前5 7d向母株噴灑菌 劑 能有效地預防和降低內源污染 增加誘變成功率 外植體的最佳選擇是蝴蝶蘭第一芽開花的帶腋芽花梗 將其切成5cm左右的小段 小鑷子去除腋芽外部苞 片 放入燒杯中 如圖3所示 在燒杯中滴入幾滴洗滌劑 用自來水沖洗6 8h 再用無菌水沖洗 然后在無菌工作臺上消毒表面 表面 用75 酒精消毒30s 用 無菌水沖洗3次 然后用0 1 HgCl2溶液浸泡花梗10min 繼續(xù)搖動 用無菌水清洗 摘 要 以蝴蝶蘭帶有腋芽的花梗作為外植體 研究多種培養(yǎng)基和不同植物生長調節(jié)劑的配比對蝴蝶蘭 火鳳凰 不定芽 誘發(fā) 增殖和生根各階段的影響 在誘導蝴蝶蘭不定芽過程中 以MS 花寶1號 花寶2號 3 00mg L6 BA 0 05mg LNAA 培養(yǎng)基為最好 不定芽增殖最優(yōu)的培養(yǎng)基為MS 花寶1號 5 00mg L6 BA 0 5mg LNAA 而生根蝴蝶蘭中 1 2MS 培養(yǎng) 基的生根率總體優(yōu)于 MS 培養(yǎng)基 且誘導蝴蝶蘭生根的最適培養(yǎng)基配方為1 2MS 1 0mg LIBA 0 5mg LNAA 關鍵詞 蝴蝶蘭 組織培養(yǎng) 關鍵技術 中圖分類號 S274 2 文獻標志碼 A 文章編號 2096 9902 2022 13 0025 03 Abstract ThepedicelswithaxillarybudsofPhalaenopsiswereusedasexplantstostudytheeffectsofdifferentmedia andplantgrowthregulatorsontheinduction proliferationandrootingofadventitiousbudsofPhalaenopsis Huofeng Inthe inductionofadventitiousbudsofPhalaenopsis thebestmediumwasMS Huabao1 Huabao2 3 00mg L6 BA 0 05mg L NAA andthebestmediumforadventitiousbudproliferationwasMS Huabao1 5 00mg L6 BA 0 5mg LNAA A mongtherootingPhalaenopsis therootingrateof1MSmediumwasbetterthanthatofMSmedium andtheoptimummedi umforinducingrootingofPhalaenopsiswas1ap2MS 1 0mg LIBA 0 5mg LNAA Keywords Phalaenopsis tissueculture keytechnology 基金項目 2020年廣西農業(yè)科技自籌項目 Z202069 作者簡介 曾燕紅 1989 女 碩士研究生 農藝師 講師 研究方向為植物組織培養(yǎng) 果蔬花卉生產(chǎn)技術 中 職涉農教育 DOI 10 20028 j zhnydk 2022 13 009 25 2022年13期試驗 研究 智慧農業(yè)導刊 JournalofSmartAgriculture 4 5次 用消毒過的濾紙將物料表面的濕氣吹干 然后 進行接種 無菌材料是蝴蝶蘭組織培養(yǎng)的一個重要條件 和保障 而滅菌是一種行之有效的方法 采用表面消毒 方法 將表面的細菌殺死 使其在最大程度上維持其活 性 所以 在蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)中 殺菌是一個非常關鍵 的環(huán)節(jié) 注 消毒時間取決于外植體的種類或成熟度 圖1 蝴蝶蘭 圖2 蝴蝶蘭組織培養(yǎng) 一 圖3 蝴蝶蘭組織培養(yǎng) 二 1 3 方法 首先是對疫苗室和操作臺進行清潔和消毒 然后是 酒精燈 消毒器 接種刀 鑷子等接種器具的準備 隨后 完成接種 將蝴蝶蘭的花梗兩端切去 將帶腋芽的花梗節(jié)切成 1 2cm的小段 根據(jù)生長極性插入培養(yǎng)基中 每個處理 接種30個外植體 重復3次 注意嚴格規(guī)范無菌操作 盡 可能減少因操作不當而引起的污染 嚴格消毒器具 減少 與病毒的交叉感染 切取外植體時要用銳利的刀具和快 速的切割 同時要避免互相擠壓 以免損傷材料 所有的 外植體取刀時 刀口的尺寸和切點都要合理 正確 例如 切花梗的下端為45 切口 上端為平面 為 了確保所需 的養(yǎng)分和光照 外 植 體 應 在 培養(yǎng)皿中均勻地分布 以MS 花寶1號 花寶2號為基質 添加不同比例 的6 BA和NAA 各培養(yǎng)基上分別接種帶有腋芽的蝴蝶 蘭花梗小段 每處理均為20個花梗段 重復3次 30d 后統(tǒng)計各處理誘導率 采用MS 花寶1號作為基質 添加了6 BA NAA 等不同比例的植物生長調節(jié)劑 將初代培養(yǎng)30d左右 的蝴蝶蘭不定芽轉入增殖培養(yǎng)基中 每次處理20個不 定芽 重復3次 培養(yǎng)30d左右時 統(tǒng)計新的不定芽的 發(fā)生情況 計算增殖系數(shù) 以1 2MS MS為基質 添加不同比例的植物生長 調節(jié)劑IBA和NAA 選擇發(fā)育均勻的蝴蝶蘭 將其接種 于不同的發(fā)芽基中進行生根實驗 每次處理20株 3次 重復 約45d后統(tǒng)計各處理出根情況 適宜的溫度為25 28 環(huán)境濕度為60 80 在 黑暗中培育7 9d 防止褐變 光照強度為2000 2500Lx 光照時間為每天11 13h 2結果與分析 2 1 不同基本培養(yǎng)基對腋芽萌發(fā)誘導的影響 將消毒后的 火鳳凰 花 梗 接 種 到 不定芽誘導培養(yǎng) 基上 14d左右開始萌發(fā)不定芽 添加不同的植物生長 調節(jié)劑配比 雖然對 火鳳凰 花 梗 誘導率不同 但添加 一定濃度的6 BA和NAA都有利于 火鳳凰 不定芽的 誘導 在9組處理中 處理5的誘導率最高 達到 86 7 即最佳的不定芽誘導培養(yǎng)基為MS 花寶1號 花寶2號 3 00mg L6 BA 0 05mg LNAA培養(yǎng)基 誘導率 萌發(fā)的外植體數(shù) 接種的總外植體數(shù) 100 2 2 不同培養(yǎng)基對不定芽增殖的影響 將不定芽從花梗中分離出來 在15d后 不定芽基 部開始生長出原球莖 25d左右逐漸長出葉片 當植物 生長調節(jié)劑NAA濃度相同時 蝴蝶蘭 火鳳凰 的 不定 芽增殖系數(shù)隨著6 BA的濃度升高而升高 但增殖系數(shù) 大時 葉片顏色淡 生長玻璃化 脆嫩 綜合增殖系數(shù)和 幼苗長勢 增殖培養(yǎng)基最優(yōu)的組合是處理6 MS 花寶1 號 5 00mg L6 BA 0 5mg LNAA 增殖系數(shù)達到 3 9 26 2022年13期 智慧農業(yè)導刊 JournalofSmartAgriculture 試驗 研究 增殖系數(shù) 增殖不定芽總數(shù) 增殖不定芽外植體數(shù) 2 3 不同生根培養(yǎng)基對幼苗生根的影響 在引種蝴蝶蘭的基本培養(yǎng)基中 1 2MS培養(yǎng)基的 生根率均高于 MS 而1 2MS 1 0mg LIBA 0 5mg L NAA的9號培養(yǎng)基 其生根率達86 7 結果表明 最適 宜的培養(yǎng)基是1 2MS 1 0mg LIBA 0 5mg LNAA 3 結論與討論 蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)是影響組織培養(yǎng)成敗的重要因 素 不同品種的蝴蝶蘭 不同的栽培材料 不同的生長時 期 不同的栽培材料對培養(yǎng)基的需求也不同 因此 對蝴 蝶蘭的培養(yǎng)基進行篩選 既是蝴蝶蘭組織培養(yǎng)的基礎 又是其重要的一步 在誘導蝴蝶蘭 火鳳凰 花梗腋芽萌發(fā)的實驗中 添 加一定濃度的6 BA和NAA都有利于 火鳳凰 不定芽 的誘導 這和高壯壯等 2 的試驗結果一致 本試驗中最佳 的不定芽誘導培養(yǎng)基為MS 花寶1號 花寶2號 3 00mg L 6 BA 0 05mg LNAA培養(yǎng)基 細胞分裂素對蝴蝶蘭不定芽增殖的試驗中 6 BA 對增殖效果的影響強于 NAA 且濃度5 00mg L6 BA 比濃度3 00mg L6 BA的增殖效果要更優(yōu) 當6 BA濃度為5 00mg L 時 NAA 濃度為1 0mg L時的 增殖系數(shù)比0 50mg L 增殖效果更高 但幼苗長勢受到 影響 所以MS作為不定芽增殖的基本培養(yǎng)基 在不 同 植物生長調節(jié)劑濃度配比下 5 00mg L6 BA 0 50mg L NAA最適合不定芽增殖生長 這個試驗結果與陳春 等 3 6 的試驗結論相似 表明蝴蝶蘭增殖時要同時增殖 系數(shù)和幼苗生長狀態(tài) 而在誘導蝴蝶蘭生根的基礎培養(yǎng)基中 1 2MS 培 養(yǎng)基的生根率總體優(yōu)于MS 培養(yǎng)基 其中生根率最高的 是1 2MS 1 0mg LIBA 0 5mg LNAA的9號培養(yǎng) 基 其生根率為86 7 由此可知 誘導蝴蝶蘭生根的最 適培養(yǎng)基配方為1 2MS 1 0mg LIBA 0 5mg L NAA 參考文獻 1 張果 趙玉安 劉曉鵬 等 國內蝴蝶蘭育種技術的研究進展 J 貴州農業(yè)科學 2020 48 9 86 92 2 高壯壯 婁倩 劉雅莉 蝴蝶蘭 大辣椒 組培快繁技術體系優(yōu)化 的研究 J 西北林學院學報 2020 35 4 95 100 211 3 陳春 蝴蝶蘭 紅箭 組織培養(yǎng)快繁技術 J 福建林業(yè)科技 2021 48 2 63 67 4 楊錄軍 王俊 楊書才 等 蝴蝶蘭新品種 鄭農火鳳凰 的組培 快繁技術研究 J 陜西農業(yè)科學 2015 61 11 52 54 5 賴思婷 豐鋒 陳樺潔 等 6 BA對火鳳凰蝴蝶蘭成花誘導的影 響 J 廣東農業(yè)科學 2021 48 5 50 56 6 楊佳麗 田時豪 朱彤 等 影響蝴蝶蘭組織培養(yǎng)的主要因素及 控制研究 J 農村科學實驗 2020 5 62 65 大智慧農業(yè)相關系列技術研究 其二 推進以農業(yè)信息化 為基礎的智能農業(yè)裝備的設計制造 提升農機設備的信 息化和智能化水平 適應智慧農業(yè)發(fā)展需求 提升我國智 慧農業(yè)裝備的供給能力和國際競爭力 其三 建設完善智 慧農業(yè)作業(yè)系統(tǒng) 其四 加大智慧農業(yè)作業(yè)技術研究力度 與無人農場建設 其五 建立并完善智慧農業(yè)信息技術標 準 注重復合型人才培養(yǎng) 總之 農業(yè)信息化是智慧農業(yè)的一個發(fā)展階段 是 信息技術在現(xiàn)代農業(yè)領域的應用 是智慧農業(yè)發(fā)展的核 心要求 二者是你中有我 我中有你的相互促進關系 大 力推進農業(yè)信息化建設是走智慧農業(yè)之路 提升我國綜 合國力的必然選擇 參考文獻 1 趙春江 智慧農業(yè)的發(fā)展現(xiàn)狀與未來展望 J 華南農業(yè)大學學 報 2021 42 6 1 7 2 孔繁濤 朱孟帥 孫坦 現(xiàn)代信息技術在農業(yè)領域的應用分析與 建議 互聯(lián)網(wǎng)企業(yè)進軍農業(yè)引發(fā)的思考 J 智慧農業(yè) 2019 1 4 31 41 3 戴崢 張晶晶 杜茜亞 等 新形勢下的農業(yè)信息化發(fā)展思考 J 現(xiàn)代化農業(yè) 2021 10 56 58 4 羅治情 官波 陳娉婷 等 大數(shù)據(jù)背景下農業(yè)農村信息化建設 研究 EB OL 2021 12 30 https S 20211229 1333 014 html 5 趙春江 智慧農業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀及戰(zhàn)略目標研究 J 智慧農業(yè) 2019 1 1 1 7 6 孫九林 李燈華 許世衛(wèi) 等 農業(yè)大數(shù)據(jù)與信息化基礎設施發(fā) 展戰(zhàn)略研究 J 中國工程科學 2021 23 4 10 19 7 謝蘇兵 崔勇彪 區(qū)塊鏈背景下的洞庭湖區(qū)農業(yè)信息化研究 J 農業(yè)科技與裝備 2021 6 107 108 8 孔繁濤 發(fā)展中的農業(yè)信息學 J 廣東農業(yè)科學 2012 39 15 219 223 9 中國政府網(wǎng) 國務院關于加快推進農業(yè)機械化和農機裝備產(chǎn)業(yè) 轉型升級的指導意見 EB OL 2018 12 29 2019 12 26 http 上接24頁 27