番茄黃化曲葉病毒與番茄褪綠病毒復合侵染對番茄黃化曲葉病毒傳播的影響.pdf

nullnullnullnullnull nullnull null nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 收稿日期 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 修訂日期 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 基金項目 null 國家自然科學基金 nullnullnullnull nullnullnullnull nullnullnullnull nullnullnullnull 國家大宗蔬菜產業(yè)技術體系 nullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull null 通信作者 null nullnullnullnullnull 史彩華 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 劉勇 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 番茄黃化曲葉病毒與番茄褪綠病毒復合侵染對 番茄黃化曲葉病毒傳播的影響 羅瑞雪 null null null 趙 null 丹 null null 潘求一 null null 曾 null 穎 null null 張戰(zhàn)泓 null 史曉斌 null null 張德詠 null null 史彩華 nullnull null 劉 null 勇 null nullnull nullnull長江大學農學院 荊州 nullnullnullnullnullnullnull nullnull湖南省農業(yè)科學院植物保護研究所 長沙 nullnullnullnullnullnullnull nullnull雙峰縣農業(yè)農村局 婁底 nullnullnullnullnullnullnull nullnull安鄉(xiāng)縣植保植檢站 常德 nullnullnullnullnullnullnull nullnull湖南省農業(yè)科學院蔬菜研究所 長沙 nullnullnullnullnullnullnull 摘要 null 番茄黃化曲葉病毒 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull 是一種由煙粉虱傳播的單鏈環(huán)狀 nullnullnull病毒 在 田間可與多種病毒發(fā)生復合侵染 如番茄褪綠病毒 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnull 等 本文對比了 nullnullnullnullnull單獨侵 染和 nullnullnullnullnull與 nullnullnullnull復合侵染對煙粉虱獲取和傳播 nullnullnullnullnull的影響 結果表明 與取食 nullnullnullnullnull單獨侵染的番 茄相比 取食復合侵染番茄的煙粉虱對 nullnullnullnullnull的傳毒率顯著提高 且番茄植株和煙粉虱體內 nullnullnullnullnull的病毒積累 量也顯著提高 試驗結果說明復合侵染會提高煙粉虱的傳毒率 促進 nullnullnullnullnull的發(fā)生與流行 關鍵詞 null 番茄黃化曲葉病毒 null 復合侵染 null 番茄褪綠病毒 null 煙粉虱 null 實時熒光定量 nullnullnull 中圖分類號 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 文獻標識碼 nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null null nullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnull null nullnull null null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull null nullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnull 番茄黃化曲葉病毒 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull 隸屬于雙生病毒科 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 菜豆 nullnull卷第 null期 羅瑞雪等 番茄黃化曲葉病毒與番茄褪綠病毒復合侵染對番茄黃化曲葉病毒傳播的影響 金色花葉病毒屬 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull null 具有單鏈 nullnull 環(huán)狀 nullnullnull 基因組 null nullnull 大小約 nullnullnullnullnull nullnullnullnullnull 于 nullnullnullnull 年在以色列被首次報道 null 隨后在全球各地迅速傳 播 中國于 nullnullnullnull 年在上海被首次報道 null nullnullnullnullnull 由煙粉虱 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 以持久性方式傳播 null 在 田間造成的損失高達 nullnullnullnullnullnullnullnull null 感染 nullnullnullnull nullnull 后 植株發(fā)育遲緩并向上卷曲 黃化 植株葉片 會變少 變小 null nullnull 番茄褪綠病毒 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnull nullnullnullnull 隸屬于長 線 形 病 毒 科 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull 毛形病毒屬 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 于 nullnull 世紀 nullnull 年代中期 在美國佛羅里達州被首次報道 中國于 nullnullnullnull 年在臺 灣被首次 報 道 nullnull 迄 今 已 在 nullnull 個國家和地區(qū)發(fā) 生 null nullnullnullnull 是由煙粉虱傳播的半持久性 nullnullnull 病 毒 帶 毒 煙 粉 虱 取 食 健 康 植 株 后 可 造 成 植 株 nullnullnullnull 的發(fā)病率 null 與大多數植物病毒不同 感染 nullnullnullnull 的植株表現為老葉先發(fā)病 葉脈間黃化褪綠 變厚變脆且邊緣向內卷曲 null nullnull 一般要 nullnullnull 周才表 現癥狀 null nullnull nullnullnullnullnull 與 nullnullnullnull 復合侵染自 nullnullnullnull 年在山東 壽光被首次報道以來 在江蘇和云南等地相繼被報 道 且 nullnullnullnullnull 和 nullnullnullnull 的 發(fā) 病 率 都 在 逐 年 上 升 nullnull nullnullnull 復合侵染的番茄植株中 nullnullnullnullnull 的帶毒 量比 nullnullnullnull 高 nullnullnullnullnullnullnull 倍 nullnull 且復合侵染會給番 茄造成 nullnullnull 以上的減產 嚴重時甚至絕收 null nullnull nullnullnull 已有研究表明 植株發(fā)生復合侵染時會產生協(xié)生作 用 發(fā)病癥狀更為嚴重 加速寄主植物死亡 nullnull nullnullnull 復 合侵染還會提高病毒的基因重組概率 導致病毒的 侵染能力和擴散速度增加 nullnull nullnullnull nullnullnullnullnull 和 nullnullnullnull 復合侵染番茄植株后 顯著提高煙粉虱獲取和傳播 nullnullnullnull 的效率 nullnull 但是復合侵染對 nullnullnullnullnull 傳播的 影響 缺乏研究 針對這一問題 本文研究了 nullnullnullnull nullnull 和 nullnullnullnull 復合侵染番茄植株后煙粉虱獲取和傳 播 nullnullnullnullnull 效率的變化 以及 nullnullnullnullnull 在煙粉虱和 番茄體內積累量的變化 并進一步明確了復合侵染 是否影響煙粉虱對 nullnullnullnullnull 的傳播 為研究 nullnullnullnull nullnull 和 nullnullnullnull 復合侵染后二者產生的協(xié)生作用及分 子機制奠定基礎 nullnull 材料與方法 nullnullnullnull 試驗材料 供試植株 番茄品種為 鉆紅美娜 該品種不抗 nullnullnullnullnull 供試昆蟲 null 型煙粉虱 由中國農業(yè)科學院蔬菜 花卉研究所張友軍研究員饋贈 之后放在 nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull 的養(yǎng)蟲籠內 nullnullnullnull null nullnull nullnullnull null null 光周期 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 條件下 用健康番茄 飼養(yǎng) 定期做生物型的鑒定 nullnull 供試菌液 含 nullnullnullnullnull 的農桿菌菌液由中國農 業(yè)科學院植物保護研究所周雪平團隊饋贈 nullnullnullnull 試驗方法 nullnullnullnullnullnull 番茄中 nullnullnullnullnull 的鑒定 用 nullnullnullnull 法提取番茄的總 nullnullnull 特異性引物 nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull 表 null 擴 增 片 段 長 度 為 nullnullnullnullnull nullnull 退火溫度為 nullnullnull 經驗證該引物特異性 及擴增效率良好 使用南京諾維贊 nullnullnullnullnullnull 生物 公司 nullnullnullnullnull null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull 試劑 盒 按照說明書步驟進行 nullnullnull 擴增 nullnullnull 產物用 nullnullnullnull 瓊脂糖電泳凝膠進行檢測 紫外燈下觀察并記 錄結果 將條帶正確的 nullnullnull 產物純化回收后送生工 生物工程 上海 股份有限公司測序 比對序列是否 正確 nullnullnullnullnullnull 煙粉虱中 nullnullnullnullnull 的鑒定 單頭煙粉虱 nullnullnull 的提取 用蛋白酶 null 和樹脂 提取單頭煙粉虱的 nullnullnull 后續(xù)鑒定步驟參照 nullnullnullnullnull 用 nullnullnullnull 法提取多頭煙粉虱的總 nullnullnull 后續(xù)鑒定步 驟參照 nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull 番茄和煙粉虱中 nullnullnullnull 的鑒定 用 nullnullnullnullnullnull 法提取番茄或煙粉虱的總 nullnullnull 后用 南京諾維贊 nullnullnullnullnullnull 生物公司的 nullnullnullnull 試劑盒 按 照說明書合成 nullnullnullnull 以 nullnullnullnull 為模板 采用特異 性引物 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull 表 null 擴增 目的片段長 度為 nullnullnullnullnull nullnull 退 火 溫 度 為 nullnullnull 后 續(xù) 步 驟 參 照 nullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull 侵染性克隆與蟲傳毒株 將 nullnullnullnullnull 病毒侵染性克隆接種在含有卡那 霉素 nullnullnullnull null 和利福平 nullnullnullnull null 的 nullnull 固體培 養(yǎng)基上 nullnullnull 恒溫培養(yǎng)箱中過夜培養(yǎng) 將活化后 的農桿菌菌體溶解在去離子水中 濃度為 nullnullnullnullnullnull null 使用 nullnullnull 醫(yī)用注射器 在健康番茄長出 nullnullnull 片真葉時 將農桿菌菌液注射到番茄莖稈上 每株 番茄接種 nullnullnullnullnull 菌液 接種后放置溫室內 nullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 的 養(yǎng) 蟲 籠 中 于 nullnullnullnull null nullnull nullnullnullnull null 光周期 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 條件下培育 nullnullnull 后用 nullnullnullnullnull 的方法進行檢測 將 nullnullnull 頭健康煙 nullnullnull nullnullnullnull 粉虱轉 移 到 感 染 了 nullnullnullnullnull 的 毒 株 上 飼 毒 nullnullnull 后 取出全部煙粉虱將其轉移到健康番茄 nullnullnull 片 真葉期 上取食 nullnullnull nullnull 后用 nullnullnullnullnull 的方法進行 檢測 復合侵染的番茄采自田間 經過 nullnullnull 以及小 nullnullnull 測序確定無其他病毒復合侵染 放入溫室內 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 的養(yǎng)蟲籠中 nullnullnullnull null nullnull nullnullnullnull null 光周期 nullnullnullnullnullnull nullnull 條件下培養(yǎng) 將 nullnullnull 頭健康煙粉虱放到 nullnullnullnullnull 和 nullnullnullnull 復合侵 染的病株上取食 nullnullnull 后 取出全部的煙粉虱將其放 到健康番茄 nullnullnull 片真葉 上取食 nullnullnull nullnullnull 后用 nullnullnullnullnull 的方法檢測 nullnullnullnullnull nullnullnull 后用 nullnullnullnullnull 的方法 檢測 nullnullnullnull 選擇 nullnullnullnullnull 的病毒量一致的復合侵 染與單獨侵染的番茄進行后續(xù)試驗 表 null null 番茄與煙粉虱帶毒情況檢測所用引物信息 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 引物名稱 nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 引物序列 nullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 退火溫度 null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 擴增片段大小 null null nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull 用途 nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnull檢測 nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnull nullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnullnullnullnull檢測 nullnullnullnullnullnullnullnull nullnullnullnullnullnullnullnull nullnulln