利用木霉菌對(duì)蝴蝶蘭白絹病生物防治的初探.pdf

DOI 10 19904 14 1160 s 2024 16 005 利用木霉菌對(duì)蝴蝶蘭白絹病生物防治的初探 陳俊生 湯 楷 劉燕榕 李 敏 杜曉霞 陳湧彬 汕頭市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所 廣東 汕頭 515021 摘 要 蝴蝶蘭作為一種重要的觀賞植物 在全球花卉市場(chǎng)中占據(jù)重要地位 然而 白絹病對(duì)蝴蝶蘭的健康生長(zhǎng)構(gòu)成 了嚴(yán)重威脅 基于此 探索利用木霉菌對(duì)白絹病致病菌的抑制作用 采用牙簽接種法研究木霉菌在蝴蝶蘭標(biāo) 準(zhǔn)栽培過程中對(duì)白絹病的防治效果 試驗(yàn)結(jié)果表明 木霉菌制劑能夠有效抑制白絹病致病菌生長(zhǎng) 對(duì)白絹病 具有良好的防治效果 為蝴蝶蘭產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供了一種新的 環(huán)保的生物防治方案 關(guān)鍵詞 木霉菌 蝴蝶蘭 白絹病 生物防治 抗病性 文章編號(hào) 1005 2690 2024 16 0015 03 中國(guó)圖書分類號(hào) S682 31 S476 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 B 作者簡(jiǎn)介 陳俊生 1976 男 漢族 廣東揭東人 本科 農(nóng)藝師 研究方向?yàn)榛ɑ苓x育種 栽培技術(shù)研究與示范推廣 蝴蝶蘭 Phalaenopsis 是一種蘭科 Orchida ceae 屬的多年生草本植物 產(chǎn)地主要分布在亞洲熱 帶地區(qū) 如我國(guó)臺(tái)灣 海南等地 以及東南亞一些國(guó) 家 蝴蝶蘭因其花朵形態(tài)酷似飛翔中的蝴蝶而得名 花形典雅 極具觀賞價(jià)值 故被譽(yù)為 洋蘭王后 或 蘭花之后 在全球廣受歡迎 1 然而 白絹病 Fusarium 對(duì)蝴蝶蘭的健康生長(zhǎng)構(gòu)成了嚴(yán)重威脅 嚴(yán)重時(shí)甚至導(dǎo)致整株死亡 影響蝴蝶蘭的產(chǎn)業(yè)化發(fā) 展 傳統(tǒng)的化學(xué)農(nóng)藥防治方法不僅對(duì)環(huán)境造成污染 還可能導(dǎo)致病原菌產(chǎn)生抗藥性 2 因此 尋找一種環(huán) 保且高效的生物防治方法成為當(dāng)務(wù)之急 木霉菌 Trichoderma 是一類廣泛分布于土壤和其他有機(jī)基 質(zhì)中的真菌 因其對(duì)環(huán)境友好 無殘留 不易產(chǎn)生抗 藥性的特點(diǎn) 常被開發(fā)作為生物防治劑 生物肥料和 土壤改良劑 3 4 本研究旨在探索利用木霉菌提高蝴 蝶蘭對(duì)白絹病的抗性 為蝴蝶蘭產(chǎn)業(yè)提供新的病害生 物防治方案 1 材料與方法 1 1 材料 試驗(yàn)于 2022 年在汕頭市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所白沙基 地 2 號(hào)大棚進(jìn)行 供試材料為大花型蝴蝶蘭 汕農(nóng)盛 世 選取表面生長(zhǎng)量基本一致 生長(zhǎng)健壯的 3 5 寸 1 寸 3 33 cm 成熟大苗進(jìn)行試驗(yàn) 試驗(yàn)試劑為哈茨 木霉微生物菌劑 1kg可濕性粉劑 2億個(gè)活菌 g 滿穗 240g L噻呋酰胺 1 2 方法 1 2 1 試驗(yàn)處理 供試病原 供試標(biāo)靶菌為汕頭市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所 白沙基地 2 號(hào)大棚采集的白絹病患病植株 提取菌 核 在 PDA 培養(yǎng)基中進(jìn)行分離 純化培養(yǎng) 經(jīng)柯赫氏 法則驗(yàn)證具有致病能力 選取健康 粗細(xì)一致的蝴蝶 蘭根 用無菌水洗凈 消毒 剪為 2 cm 長(zhǎng)的根段 放入白絹病菌落中培養(yǎng)備用 處理方法 試驗(yàn)選取健康且長(zhǎng)勢(shì)一致的 3 5 寸成 熟蝴蝶蘭苗 以人工接種的方式處理健康植株 在每 株苗的單軸莖根部接種 2 條長(zhǎng)滿白絹病菌絲的蝴蝶蘭 根 24 h 后 2022 年 6 月 23 日 實(shí)施藥劑處理 設(shè) 置 4 個(gè)處理 分別為對(duì)照組 CK 清水 處理 1 滿穗 240 g L 噻呋酰胺 2 000 倍噴霧 以葉面滴水 為準(zhǔn) 處理 2 木霉菌劑 200 倍灌根 處理 3 接種 白絹病菌絲前 7 d 2022 年 6 月 15 日 進(jìn)行木霉菌 劑 200 倍灌根 隨機(jī)區(qū)組排列 每個(gè)處理 24 株 設(shè) 3 次重復(fù) 每個(gè)重復(fù) 8 株 蘭苗選用國(guó)產(chǎn)水苔作為栽 培基質(zhì) 試驗(yàn)期間嚴(yán)格按照 蝴蝶蘭栽培技術(shù)規(guī)程 GB T28683 2012 標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行栽培管理 1 2 2 指標(biāo)測(cè)定 栽培試驗(yàn)期間每隔 7 d 對(duì)試驗(yàn)苗進(jìn)行調(diào)查記錄 病害分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)主要依據(jù)整株植物的表現(xiàn)來判定 具體 的分級(jí)如下 0 級(jí) 整株無癥狀 1 級(jí) 植物基部近 地面處出現(xiàn)水漬狀不規(guī)則褐色小斑點(diǎn) 3 級(jí) 植物基 部和栽培基質(zhì)表面有少量白色棉絮狀菌絲 5 級(jí) 菌 絲在植物基部擴(kuò)散 并有少量白菜籽狀菌核 7 級(jí) 植物基部及栽培基質(zhì)有大量褐色菌核 植物基部腐爛 嚴(yán)重 9 級(jí) 植株萎蔫死亡 5 根據(jù)調(diào)查結(jié)果 按照 式 1 3 計(jì)算白絹病發(fā)病率 病情指數(shù)和防治 效果 發(fā)病率 發(fā)病株數(shù) 調(diào)查株數(shù) 100 1 病情指數(shù) 病級(jí)數(shù) 該級(jí)病株數(shù) 最高 病級(jí)數(shù) 調(diào)查總株數(shù) 100 2 防治效果 對(duì)照病情指數(shù) 處理病情指數(shù) 對(duì) 照病情指數(shù) 100 3 試驗(yàn)研究 EXPERIMENTALSTUDY 15 2024年第16期 1 2 3 數(shù)據(jù)分析 數(shù)據(jù)采用DPS9 01軟件進(jìn)行分析 2 結(jié)果與分析 2 1 木霉菌劑對(duì)白絹病發(fā)病率的影響 如圖 1 所示 對(duì)照組 CK 在沒有采取任何防治措 施的情況下 接種 7 d 發(fā)病率已達(dá)到 95 8 第 3 次 調(diào)查時(shí) 接種后第 20 天 已全部發(fā)病 而處理 1 和 處理 2白絹病發(fā)病率在接種后 13d內(nèi)基本維持在同一 個(gè)范圍 25 30 變化不明顯 但從第13天開始 處理 1 的發(fā)病率開始升高 到接種后第 20 天達(dá)到近 46 這表明發(fā)病初期木霉菌劑與化學(xué)藥劑同時(shí)分別 施用具有相似的防治效果 但隨著時(shí)間的推移 化學(xué) 藥劑的藥效逐步衰減 導(dǎo)致致病率迅速增加 而木霉 菌劑的效果則相對(duì)保持平穩(wěn) 同時(shí) 處理 3 的 3 次調(diào) 查發(fā)現(xiàn)白絹病發(fā)病率一直都保持在 10 之內(nèi) 其發(fā) 病率明顯比對(duì)照組 CK 和處理 1 處理 2 低很多 到 第 20 天也僅為 8 33 可見先灌施木霉菌劑后接種 病原菌對(duì)白絹病的防控效果最好 2 2 木霉菌劑對(duì)白絹病相對(duì)防治效果的影響 如表 1 所示 施用木霉菌劑及噻呋酰胺后 蝴蝶 蘭白絹病均可得到有效抑制 但不同處理的防治效果 存在明顯差異 接種后 7 d 調(diào)查 各處理間病情指數(shù) 差異達(dá)極顯著水平 處理 3 相對(duì)防治效果達(dá)到 98 84 優(yōu)于處理 2 的 83 72 和處理 1 的 93 02 雖然處理 1 與處理 3 在相對(duì)防治效果上差異不顯著 但從環(huán)保角度考慮 生物防治方法處理 3 在生態(tài)友好 性方面顯著優(yōu)于化學(xué)防治處理 1 接種第 13 天 處 理 1 和處理 3 的病情指數(shù)差異不顯著 且相對(duì)防治效 果變化不大 依然維持在 90 以上 而處理 2 的病 情指數(shù)已達(dá)到 17 相對(duì)防治效果降至 75 71 接種 第 20 天 3 個(gè)處理的病情指數(shù)均有所升高 其中處 理 1 的病情指數(shù)增速最快 與處理 3 又體現(xiàn)出顯著差 異 同時(shí) 3 個(gè)處理對(duì)白絹病的相對(duì)防治效果分別為 81 40 70 93 和 90 70 均有所下降 但處理 3 的相對(duì)防治效果依然維持在較高水平 處理 1 防治效 果下降最為明顯 說明隨著施用時(shí)間的增加 化學(xué)藥 劑的防治效果會(huì)逐步降低 而木霉菌劑則會(huì)保持相對(duì) 較為平穩(wěn)的水平 這可能因?yàn)槟久咕鷦榛铙w菌劑 其自身可以定殖并大量繁殖 所以在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)依舊 可以保持較高的防治效果 通過對(duì)比處理 3 與處 理 2 可發(fā)現(xiàn)處理 3 具有明顯的防治優(yōu)勢(shì) 這可能是 因?yàn)楣哪久股L(zhǎng)速度快 先灌施哈茨木霉可以使其 迅速占位并大量繁殖 當(dāng)病原菌入侵時(shí)可抑制病原菌 生長(zhǎng) 具有更加明顯的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì) 起到更好的防治效 果 而如果先接種病原菌 則會(huì)使病原菌先行繁殖 木霉菌抵御病原菌的效果會(huì)有所減弱 6 3 討論與結(jié)論 現(xiàn)有研究表明木霉在自然界中具有分布范圍廣 生存能力及適應(yīng)性強(qiáng)的特點(diǎn) 根據(jù)不完全統(tǒng)計(jì) 木霉 9 個(gè)主要種中有 5 個(gè)種具有生防潛力 至少對(duì) 18 個(gè) 屬 29 種植物病原真菌有拮抗作用 同時(shí)具有對(duì)環(huán)境 為害小 甚至可降解已有化學(xué)農(nóng)藥殘留的作用 因此 其具有重要的社會(huì)經(jīng)濟(jì)意義 國(guó)內(nèi)外對(duì)木霉生防菌劑 的開發(fā) 生防機(jī)制的研究正在如火如荼地進(jìn)行 已應(yīng) 用到各類枯萎病 紋枯病 辣椒疫病 棉花黃萎病 白絹病 立枯病等土傳病害及葉斑病 灰霉病等葉部 圖1 木霉菌劑和化學(xué)藥劑在蝴蝶蘭大苗期對(duì)白絹病發(fā)病率的影響 調(diào)查日期 CK 處理1 處理2 處理3 6月30日 7月6日 7月13日 120 100 80 60 40 20 0 發(fā)病率 95 8 95 8 100 25 29 17 45 83 29 17 25 20 8 4 17 4 17 8 33 16 病害的防治 7 9 目前 國(guó)內(nèi)對(duì)利用木霉菌防治糧食 蔬菜 藥用植物 果林的土傳病害和一些葉部病害已 有大量研究 10 11 但利用木霉對(duì)花卉 樹木病害的生 防研究則較少有報(bào)道 隨著生態(tài)文明建設(shè)日益深入人 心 以及花卉 經(jīng)濟(jì)林木對(duì)于提升當(dāng)?shù)剞r(nóng)戶生活水平 的作用逐漸增強(qiáng) 如蝴蝶蘭 石斛蘭等花卉以及核 桃 茶樹等經(jīng)濟(jì)林的大面積種植 集約化的生產(chǎn)為病 害的發(fā)生和流行提供了有利條件 一些植物病害的發(fā) 生日趨嚴(yán)重 開展上述植物病害生防研究工作已迫在 眉睫 本試驗(yàn)結(jié)果表明 在配備水簾 風(fēng)機(jī) 遮陽等 栽培設(shè)施大棚條件下 同時(shí)分別施用木霉菌劑及化學(xué) 農(nóng)藥 短期內(nèi)木霉菌劑對(duì)蝴蝶蘭白絹病的防治效果不 如化學(xué)農(nóng)藥的防治效果 但提前 7 d 對(duì)蝴蝶蘭進(jìn)行灌 根處理 使其在接種白絹病菌絲前在栽培基質(zhì)中定 植 其防治效果則優(yōu)于化學(xué)農(nóng)藥 20 d 內(nèi)相對(duì)防效可 達(dá)到 90 70 體現(xiàn)了農(nóng)作物 預(yù)防為主 綜合防治 治早 治小 治了 的防治原則 為木霉菌在花卉 真菌性病害生防研究提供了新的策略 由于條件所限 本試驗(yàn)只探索了即時(shí)施用和提前 7 d 施用木霉菌劑的相對(duì)防治效果 未來可進(jìn)一步拓 展研究深度 為對(duì)其具體作用機(jī)制 促生作用及在基 質(zhì)中的存活時(shí)間等問題進(jìn)行深入研究 12 以優(yōu)化木霉 菌的使用劑量和方法 提高其在蝴蝶蘭病害防治中的 效果 此外 本試驗(yàn)僅針對(duì)蝴蝶蘭白絹病進(jìn)行了試 驗(yàn) 未來可以擴(kuò)大研究范圍 探討木霉菌對(duì)其他花 卉 其他病原體的防治效果 參考文獻(xiàn) 1 李聚奎 試論蝴蝶蘭的特征特性及栽培管理技術(shù) J 現(xiàn)代 園藝 2016 21 30 32 2 李良 申功進(jìn) 邵志和 哈茨木霉對(duì)茉莉白絹病生物防治的 研究 J 浙江大學(xué)學(xué)報(bào) 農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版 1983 3 25 29 3 尤佳琪 吳明德 李國(guó)慶 木霉在植物病害生物防治中的應(yīng) 用及作用機(jī)制 J 中國(guó)生物防治學(xué)報(bào) 2019 35 6 966 976 4 賽牙熱木 哈力甫 鄧勛 宋小雙 等 木霉菌生物防治及促 進(jìn)植物生長(zhǎng)機(jī)制研究進(jìn)展 J 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào) 2020 42 3 237 247 5 魏林 梁志懷 呂剛 等 哈茨木霉T2 16菌劑對(duì)建蘭防病及 促生長(zhǎng)效果的研究 J 中國(guó)園藝文摘 2017 33 2 45 48 6 靳亞忠 熊亞男 齊娟 等 黃瓜嫁接苗與接種哈茨木霉菌 黃瓜直根苗對(duì)根腐病防效及根系生理響應(yīng) J 干旱地區(qū) 農(nóng)業(yè)研究 2022 40 4 10 22 7 趙興麗 陶剛 婁璇 等 鉤狀木霉在辣椒根際定殖動(dòng)態(tài)及 其對(duì)辣椒疫病的生物防治 J 中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào) 2020 22 5 106 114 8 馬光恕 梁梟 李梅 等 木霉菌對(duì)黃瓜生理特性及立枯病 防治效果的影響 J 中國(guó)生物防治學(xué)報(bào) 2021 37 2 277 285 9 劉雪瑩 抗生素殺菌劑與木霉菌聯(lián)合應(yīng)用對(duì)黃瓜棒孢葉斑 病的防治效果 D 秦安 山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2022 10 陳捷 竇愷 高永東 等 木霉菌在玉米病害生物防治中的 作用機(jī)制及應(yīng)用 英文 J 菌物學(xué)報(bào) 2014 33 6 1154 1167 11 丁萬隆 程惠珍 陳君 應(yīng)用木霉制劑防治幾種藥用植物 病害的研究 J 中國(guó)中藥雜志 2003 1 28 31 12 孫虎 楊麗榮 全鑫 等 木霉生防機(jī)制及應(yīng)用的研究進(jìn)展 J 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào) 2011 27 3 242 246 編輯 牛 佳 調(diào)查日期 2022年 6月30日 2022年 7月6日 2022年 7月13日 處理代號(hào) CK 處理1 處理2 處理3 CK 處理1 處理2 處理3 CK 處理1 處理2 處理3 發(fā)病率 95 80 25 00 20 80 4 17 95 80 29 17 25 00 4 17 100 00 45 83 29 17 8 33 病情指數(shù) 43 1 3 aA 3 0 5 cC 7 1 5 bB 0 5 0 12 dD 70 17 aA 7 1 5 cC 17 8 bB 4 1 3 cC 86 2 98 aA 16 6 28 cC 25 11 6 bB 8 2 61 dD 相對(duì)防治效果 93 02 83 72 98 84 90 00 75 71 94 29 81 40 70 93 90 70 注 數(shù)字后不同字母表示Duncan s檢測(cè)在0 05水平下 小寫字母 和0 01水平下 大寫字母 顯著 表1 木霉菌劑和化學(xué)藥劑在蝴蝶蘭大苗期對(duì)白絹病的防治效果 試驗(yàn)研究 EXPERIMENTALSTUDY 17