茄子褐紋病病菌種類和藥劑敏感性研究 (1).pdf

DOI 10 3865 j issn 1001 3547 2025 08 007 吳仁鋒 男 武漢市農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所正高職高級(jí)農(nóng)藝師 湖北省 植物病理學(xué)會(huì)副理事長(zhǎng) 武漢市 十百千人才工程 人選 武漢市青 年崗位能手 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)藥登記藥效試驗(yàn)殺菌劑項(xiàng)目技術(shù)負(fù)責(zé) 人 主要從事植保專業(yè)技術(shù)工作 重點(diǎn)開(kāi)展蔬菜病害的診斷和綜合 防控技術(shù)研究 以及相關(guān)的技術(shù)推廣工作 近年來(lái) 作為主要完成人 獲得農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)牧漁業(yè)豐收獎(jiǎng)1 項(xiàng) 湖北省科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)1項(xiàng) 武漢市科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)2項(xiàng) 取 得湖北省科技成果4項(xiàng) 武漢市科技成果4項(xiàng) 申報(bào)國(guó)家發(fā)明專利 7項(xiàng) 取得授權(quán)發(fā)明專利2項(xiàng) 實(shí)用新型專利 3 項(xiàng) 發(fā)表科研論文 80多篇 茄子褐紋病病菌種類和藥劑敏感性研究 馮吉 1 張傳清 1 王宏 1 2 1 浙江農(nóng)林大學(xué)現(xiàn)代農(nóng)學(xué)院 杭州臨安 311300 2 杭州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院 茄子 Solanum melongena L 作為一種重要蔬 菜 在中國(guó)各省均有栽培 根據(jù)聯(lián)合國(guó)糧食及農(nóng)業(yè) 組織統(tǒng)計(jì) 2021年我國(guó)茄子總產(chǎn)量占世界茄子總產(chǎn) 量的 63 9 1 杭茄系列是浙江地區(qū)種植的主要品 種 其特點(diǎn)是果實(shí)細(xì)長(zhǎng)線條形 肉質(zhì)軟嫩 產(chǎn)量高 抗逆性強(qiáng) 適合在浙江地區(qū)高濕環(huán)境中生長(zhǎng) 2 茄子褐紋病又稱褐腐病 是茄子主要病害之 一 從苗期到成株期均可產(chǎn)生為害 以為害果實(shí)為 主 最初在果實(shí)表面形成褐色圓形病斑 病部著生 小黑點(diǎn) 并組成明顯的輪紋 最后軟腐脫落 3 莖部 感染病原菌 病斑呈梭形 并散生小黑點(diǎn) 嚴(yán)重時(shí)木 質(zhì)部外露 整株枯死 茄子褐紋病病原菌有性態(tài)為 間座殼屬 Diaporthe 無(wú)性態(tài)為擬莖點(diǎn)霉 Phomopsis 國(guó)內(nèi)之前報(bào)道引起茄子褐紋病的病原 菌有擬莖點(diǎn)霉 P longicolla 和 P vexans 4 5 國(guó)外 報(bào) 道 侵 染 茄 子 的 間 座 殼 菌 有 D arecae D melongenae D passifloricola D solani melongenae D talong和D vexans 其中D vexans為優(yōu)勢(shì)種類 6 目 前 國(guó)外對(duì)茄子褐紋病病原菌的鑒定通常采用形態(tài) 學(xué)和分子生物學(xué)結(jié)合的方法 但國(guó)內(nèi)研究茄子褐紋 摘 要 褐紋病是茄子主要病害之一 嚴(yán)重影響茄子產(chǎn)量和品質(zhì) 早期研究報(bào)道茄子褐紋病病原菌主要為褐紋擬莖 點(diǎn)霉 Phomopsis vexans 為明確茄子褐紋病病菌種類 對(duì)褐紋病病菌進(jìn)行了分離 鑒定 對(duì)發(fā)病及健康樣品進(jìn)行了 ITS 擴(kuò)增子測(cè)序 研究結(jié)果表明 結(jié)合形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)方法 分離獲得的褐紋病病菌鑒定為 Diaporthe vexans D sojae 和 D unshiuensis 3 種 對(duì)健康和發(fā)病茄子植株微生物群落分析發(fā)現(xiàn) 褐紋病的發(fā)生水平與間座殼菌豐度相關(guān) 采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定了 3 種病菌對(duì) 4 種殺菌劑的敏感性 研究結(jié)果表明 戊唑醇 咪鮮胺 丙硫菌唑和吡唑醚菌 酯對(duì)茄子褐紋病病原菌生長(zhǎng)均有明顯抑制作用 其中咪鮮胺抑菌活性最強(qiáng) 平均 EC 50 值為 0 019 g mL 研究結(jié)果為 茄子褐紋病的防治提供了基礎(chǔ)和依據(jù) 關(guān)鍵詞 茄子褐紋病 間座殼菌 病原菌鑒定 藥劑敏感性 中圖分類號(hào) S436 421 1 3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1001 3547 2025 08 0022 06 2025 8 馮吉 1999 女 在讀碩士 研究方向?yàn)橘Y源利用與植物保 護(hù) E mail 1208996232 王宏 1981 女 通訊作者 碩士 高級(jí)農(nóng)藝師 主要從事蔬 菜新品種選育與栽培技術(shù)研究工作 E mail hongwang201010 收稿日期 2024 12 09 22 表 1 用于擴(kuò)增茄子間座殼屬 ITS TEF1 的引物 基因 引物名稱 序列 5 3 參考文獻(xiàn) ITS ITS1 TCCGTAGGTGAACCTGCGG 13 ITS4 TCCTCCGCTTATTGATATGC TEF1 EF 1F 728 CATCGAGAAGTTCGAGAAGG 14 EF 1R 986 TACTTGAAGGAACCCTTACC 表 2 敏感性測(cè)定中不同藥劑處理質(zhì)量濃度 g mL 藥劑 質(zhì)量濃度 戊唑醇 0 01 0 05 0 25 0 50 1 00 咪鮮胺 0 006 25 0 012 50 0 025 00 0 050 00 0 125 00 丙硫菌唑 0 01 0 05 0 25 0 50 1 00 吡唑醚菌酯 0 002 0 010 0 050 0 250 0 500 病病原菌的文獻(xiàn)較老 以形態(tài)學(xué)鑒定為主 因此 鑒 定到的褐紋病菌種類較少 7 且在中國(guó)農(nóng)藥信息網(wǎng) 還未查詢到針對(duì)茄子褐紋病登記的防治藥劑 生產(chǎn) 上常使用百菌清 代森錳鋅和克菌丹等藥劑防治 8 但由于這些藥劑頻繁使用 出現(xiàn)了防治效果下降的 現(xiàn)象 因此篩選適宜的防治藥劑有助于及時(shí)控制病 害發(fā)生 提質(zhì)增效 本研究針對(duì)綜合形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)等對(duì)茄 子褐紋病病原菌進(jìn)行鑒定 使用 ITS 擴(kuò)增子測(cè)序分 析健康和發(fā)病植株間座殼菌 Diaporthe 相對(duì)豐度 并測(cè)定不同種類對(duì)藥劑的敏感性 以期為茄子褐紋 病準(zhǔn)確鑒定及田間防控措施的制定提供支撐 1 材料與方法 1 1 供試藥劑與供試培養(yǎng)基 試劑 97 戊唑醇原藥 Tebuconazole 江蘇揚(yáng) 農(nóng)化工集團(tuán)有限公司 97 咪鮮胺原藥 Prochloraz 浙江天豐生物科學(xué)有限公司 95 吡唑醚菌酯原藥 Pyraclostrobin 浙江新農(nóng)化工股份有限公司 97 丙硫菌唑原藥 Prothioconazole 江西正邦化工有限 公司 將4種藥劑原藥使用甲醇配制成質(zhì)量濃度為 1 10 5 g mL的母液 于4 保存?zhèn)溆?馬鈴薯葡萄糖瓊脂 PDA 培養(yǎng)基 馬鈴薯200 g 葡萄糖20 g 瓊脂粉16 g 用無(wú)菌水定容至1 L 1 2 病原菌采集與分離 2023年8月 在臨安區(qū)發(fā)現(xiàn)茄子植株大量枯萎 死亡 其果實(shí)產(chǎn)生褐色凹陷病斑 并密生輪紋小黑 點(diǎn) 莖稈上產(chǎn)生梭形水浸狀病斑 著生大量小黑點(diǎn) 初步判斷為茄子褐紋病 將發(fā)病植株樣本采用組織 分離法 9 取茄子病健交界處的組織 5 mm 5 mm 用 75 酒精消毒 30 s 用 2 NaClO 液消毒 40 s 用無(wú)菌水沖洗 3 次 晾干后放于 PDA 培養(yǎng)基上 在 25 恒溫培養(yǎng)箱黑暗培養(yǎng)3 5 d后 取菌落邊緣菌 絲塊放于 PDA 平板上生長(zhǎng)產(chǎn)孢 產(chǎn)孢后配制孢子 懸浮液涂板 挑取單個(gè)孢子純化菌株 共分離獲得 26株單孢菌株 保存用于后續(xù)鑒定與其他試驗(yàn) 1 3 病原菌致病性測(cè)定 茄子褐紋病菌致病性測(cè)定 10 選取健康無(wú)病的 茄子果實(shí) 使用燒熱的直徑 5 mm 的打孔器取果實(shí) 表皮 將活化3 d 的菌株邊緣打取5 mm菌碟 覆蓋 在茄子傷口處 以PDA空白作對(duì)照 CK 隨機(jī)挑選 9 株不同形態(tài)的代表性菌株進(jìn)行接種 每菌株接種 3 個(gè)茄子 每個(gè)茄子接種 9 個(gè)菌碟 置于 25 條件 下培養(yǎng)5 d后 觀察發(fā)病情況 1 4 病原菌形態(tài)學(xué)觀察 選上述 9 株菌株進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察 將菌株在 PDA 培養(yǎng)基上活化 3 d 用直徑 5 mm 的打孔器在 邊緣打取菌碟 每菌株打 3 個(gè)菌碟 每個(gè)菌碟轉(zhuǎn)接 至1個(gè)新 PDA 平板后于 25 黑暗培養(yǎng) 菌絲長(zhǎng)滿 PDA平板后觀察菌落形態(tài)特征 產(chǎn)孢子后 用顯微 鏡觀察孢子形態(tài) 根據(jù)菌落形態(tài)和孢子特征參考王 先洪等 11 的方法進(jìn)行病原菌初步鑒定 1 5 病原菌分子生物學(xué)鑒定 使用CTAB 法提取 ED6 ED8 和 ED9 3 株菌株 的DNA 使用表1引物擴(kuò)增出核糖體內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū) Internal transcribed spacer ITS 翻譯延長(zhǎng)因子 Translation elongation factor 1 TEF1 反應(yīng)體系 及程序參考賴多等 12 的方法 PCR產(chǎn)物由北京擎科 生物科技股份有限公司進(jìn)行測(cè)序 將測(cè)序結(jié)果在 NCBI 中進(jìn)行 BLAST 比對(duì) 下載標(biāo)準(zhǔn)菌株序列信 息 將菌株序列在MEGA軟件中矯正后串聯(lián)單個(gè)基 因 以 D ampelina CBS 267 80 作為外群 使用貝葉 斯法 Bayesian 構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù) 1 6 褐紋病發(fā)生與微生物群落關(guān)系 于2023 年8月在臨安區(qū)采集茄子植株 設(shè)健 康和發(fā)病 2 個(gè)處理 每處理 3 株 將植株分為上部 分枝 中部 嫁接口 和下部 主干 3 個(gè)部位分別 取樣分析 每個(gè)部位重復(fù)3次 將樣品研磨混勻后 使用TGuide S96磁珠法DNA提取試劑盒提取不同 部位樣品的總DNA 擴(kuò)增真菌的ITS rDNA ITS1區(qū) 片段 對(duì)擴(kuò)增PCR產(chǎn)物進(jìn)行純化 定量和均一化處 理 文庫(kù)采用Qsep 400方法進(jìn)行質(zhì)檢 滿足指標(biāo)后 可上機(jī)檢測(cè) 合格的文庫(kù)在 Illumina Novaseq 6000 上進(jìn)行測(cè)序 將高通量測(cè)序獲得的原始圖像數(shù)據(jù)文 2025 8 23 件通過(guò)堿基識(shí)別 Base calling 分析轉(zhuǎn)換成原始測(cè)序 讀長(zhǎng) Raw sequenced reads 測(cè)序結(jié)果保存在FASTQ 格式文件中 將Raw Reads去除序列后進(jìn)行拼接和過(guò) 濾 使用QIME2 2020 6軟件dada2去噪和去除嵌合 體序列 15 得到最終序列數(shù)據(jù) 1 7 藥劑篩選 采用菌絲生長(zhǎng)速率法 16 將 ED6 ED8 和 ED9 3 株菌株在PDA培養(yǎng)基上活化3 d后 根據(jù)藥劑濃度 配制含梯度藥劑的PDA平板 表2 使用直徑5 mm 的打孔器在菌落邊緣打取菌碟 將菌碟接種至含不 同濃度藥劑的 PDA 平板上 以不含藥但含相同溶 劑的 PDA 平板作對(duì)照 CK 1 每個(gè)平板接種 1 個(gè)菌 碟 每個(gè)菌碟每個(gè)濃度重復(fù)3個(gè)PDA平板 將接種 后的 PDA 平板放入 25 黑暗條件下培養(yǎng) 5 d 后 采用十字交叉法測(cè)量菌落的直徑 抑制率 對(duì)照組菌落直徑 處理組菌落直 徑 對(duì)照組菌落直徑 菌碟原始直徑 100 1 8 數(shù)據(jù)分析 使用SPSS軟件計(jì)算不同藥劑對(duì)病原菌的抑制 中濃度 EC 50 值 和毒力回歸方程 2 結(jié)果與分析 2 1 病原菌分離與致病性測(cè)定 對(duì)樣本進(jìn)行組織分離后得到 26 株菌株 根據(jù) 形態(tài)特征進(jìn)行初步分類 隨機(jī)挑選9株不同形態(tài)的 代表性菌株進(jìn)行致病性測(cè)定 結(jié)果表明 接種后5 d 茄子開(kāi)始出現(xiàn)發(fā)病癥狀 接種后 11 d 接種茄子全 部發(fā)病 均出現(xiàn)褐色病斑 表明分離的菌株對(duì)茄子 均有致病性 圖1 2 2 病原菌形態(tài)學(xué)特征 根據(jù)菌落形態(tài)特征 9株菌可分為3類 分別以 ED6 ED8 ED9 為代表菌株 圖 2 4 ED6 菌落白 色毛氈狀 氣生菌絲發(fā)達(dá)形成同心輪紋 菌落在 PAD培養(yǎng)基上呈現(xiàn)淡黃色 培養(yǎng) 20 d 后 菌絲上散 生大量黑色分生孢子器 ED8菌絲較稀疏 菌落正 面為白色 背面有黃色色素沉積 培養(yǎng) 20 d 后產(chǎn)生 少量分生孢子器 ED9菌絲白色稀疏狀 氣生菌絲 不發(fā)達(dá) 菌落正面與背面均為白色 培養(yǎng) 20 d 后產(chǎn) 生的黑色分生孢子器較少 對(duì)3種菌落鏡檢分生孢 子 發(fā)現(xiàn)均產(chǎn)生兩種類型的分生孢子 一種為 型 分生孢子 卵圓形單孢 含有兩個(gè)油球 另一種為 型分生孢子 孢子線形 無(wú)油球 2 3 病原菌系統(tǒng)發(fā)育分析 對(duì)供試菌株 ITS TEF1 片段測(cè)序后分別得到 550 bp 和 340 bp 的序列 將序列在 NCBI 中進(jìn)行 BLAST 比對(duì) 在 GenBank 中下載相關(guān)的模式菌株 序列 表 3 進(jìn)行聯(lián)合系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)分析 17 18 建樹(shù)結(jié) 果表明 圖 5 分離的菌株屬于 3 個(gè)分支 供試菌 株 ED6 位于 D vexans 種群內(nèi) ED8 與 D sojae 歸 為一類 ED9與D unshiuensis為一類 結(jié)合形態(tài)特 征 將茄子褐紋病病原菌鑒定為D vexans D sojae和 D unshiuensis 3種 2 4 褐紋病發(fā)生與微生物群落關(guān)系 對(duì)茄子健康和發(fā)病植株微生物群落進(jìn)行測(cè)序 分析 真菌共得到 2 236 個(gè) OTUs 分別屬于 13 個(gè) 門(mén) 45 個(gè)綱 105 個(gè)目 224 個(gè)科 457 個(gè)屬和 656 個(gè) 種 對(duì)不同樣品不同部位的物種相對(duì)豐度進(jìn)行分 析 發(fā)現(xiàn)健康植株分枝 主干和嫁接口的Shannon 指數(shù)值分別為 6 313 2 6 095 9 和 6 142 4 發(fā)病植 株分枝 主干和嫁接口的 Shannon 指數(shù)值分別為 6 372 6 5 666 0和5 051 4 Shannon指數(shù)越大說(shuō)明 樣品的物種多樣性越高 因此 發(fā)病植株分枝處的 物種多樣性高于健康分枝處 而在其他部位的物種 多樣性小于健康植株 對(duì)不同部位間座殼菌多樣性進(jìn)行分析 發(fā)現(xiàn)健 康植株上部分枝處間座殼菌相對(duì)豐度為 0 而嫁接 口和主干處間座殼菌相對(duì)豐度分別為 0 004 3 和 0 004 5 發(fā)病植株上部 嫁接口 莖基部均存在間 座殼菌 且上部植株間座殼菌 相對(duì)豐度為1 327 6 間座殼 菌分布最多 中部和下部分別 為0 076 0 和0 062 4 表4 2 5 藥劑篩選 選 3 個(gè)不同菌種的菌株 ED6 D vexans ED8 D sojae ED9 D unshiuensis 作供試菌株 藥劑篩選試驗(yàn) 圖 1 茄子褐紋病菌致病性測(cè)定 注 A 對(duì)照 CK B C D分別為 ED6 ED8 ED9 均是茄子接種后 11 d的發(fā)病表現(xiàn) 2025 8 24 結(jié)果表明 表 5 戊唑醇 咪鮮胺 丙硫菌唑和吡唑 醚菌酯對(duì)茄子褐紋病病菌 均有較好的抑菌效果 戊 唑醇對(duì)間座殼菌的EC 50 值 在 0 048 0 250 g mL 平 均值為 0 137 g mL 咪鮮 胺對(duì)間座殼菌的EC 50 值在 0 002 0 033 g mL 平均 值為 0 019 g mL 丙硫菌 唑?qū)﹂g座殼菌的EC 50 值在 0 329 0 679 g mL 平均 值為 0 530 g mL 吡唑醚 菌酯對(duì)間座殼菌的EC 50 值 在 0 008 0 060 g mL 平 均值為0 033 g mL 表明 咪鮮胺對(duì) 3 種菌種的抑菌 活性最強(qiáng) 3 討論與結(jié)論 茄子褐紋病病原菌 有 性 態(tài) 為 間 座 殼 屬 Diaporthe 無(wú)性態(tài)為擬 近點(diǎn)霉屬 Phomopsis Diaporthe 作為植物內(nèi)生菌 和致病菌 19 是引起作物病 害的主要病原菌之一 包 括根腐病 果腐病 葉斑病 和枯萎病等 20 間座殼屬只鑒定形態(tài) 特征往往不準(zhǔn)確 因此發(fā) 展了結(jié)合分子生物學(xué)的系 統(tǒng)鑒定方法 Aumentado等 6 通過(guò)多基因系統(tǒng)發(fā)育分析 鑒定出侵染茄子的間座殼 菌有D solani melongenae D talong D melongenae D arecae D passifloricola 和 D vexans 其中 D vexans 為多個(gè)國(guó)家引起茄子病害 的主要病原菌 本研究結(jié)合形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)的 方法 利用 ITS 和 TEF 鑒定出茄子褐紋病菌有 D vexans D sojae D unshiuensis 3種 目前國(guó)內(nèi)鑒定 到的茄子褐紋病菌大部分為P vexans 是D vexans 的無(wú)性態(tài) 據(jù)報(bào)道 D sojae是引起大豆莖枯病和柑 橘褐腐病的病原菌 21 D unshiuensis 在中國(guó)首次報(bào) 表 3 本研究構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)的間座殼屬真菌 GenBank 登錄號(hào) 種 菌株號(hào) 寄主 采集地 基因登錄號(hào) ITS TEF D ampelina CBS 267 8 葡萄 意大利 KC343018 KC343744 D arctii CBS 139280 牛蒡 奧地利 KJ590736 KJ590776 D guangdongensis ZHKUCC20 0014 柚 中國(guó) MT355684 MT409338 D helianthi CBS 592 81 向日葵 塞爾維亞 KC343115 KC343841 D hordei CBS 481 92 青稞 挪威 KC343120 KC343846 D longispora CBS 194 36 茶子屬 加拿大 KC343135 KC343861 D neoarctii CBS 109490 豚草 美國(guó) KC343145 KC343871 D sojae FAU635 大豆 美國(guó) KJ590719 KJ590762 D tectonendophytica MFLUCC 13 0471 柚木 泰國(guó) NR 147591 KU749367 D unshiuensis CGMCC 3 17566 金柑 中國(guó) KJ490584 KJ490463 D unshiuensis CFCC 52594 美國(guó)山核桃 中國(guó) MH121529 MH121571 D vexans CBS 127 14 茄 美國(guó) KC343229 KC343955 D vexans FAU597 茄屬 多米尼加 KJ590734 KJ590774 圖 2 菌株 ED6在 PDA上的形態(tài)特征 注 A 菌落正 背面形態(tài) B 分生孢子器 C 型分生孢子 D 型分生孢子 標(biāo)尺 20 m 圖 3 菌株 ED8在 PDA上的形態(tài)特征 注 A 菌落正 背面形態(tài) B 分生孢子器 C 型分生孢子 D 型分生孢子 標(biāo)尺 20 m 圖 4 菌株 ED9在 PDA上的形態(tài)特征 注 A 菌落正 背面形態(tài) B 分生孢子器 C 型分生孢子 D 型分生孢子 標(biāo)尺 20 m 2025 8 25 表 5 4 種殺菌劑室內(nèi)毒力測(cè)定 藥劑 菌株 毒力回歸方程 EC 50 值 g mL 1 戊唑醇 ED6 y 2 488x 2 346 0 114 ED8 y 0 935x 0 563 0 250 ED9 y 1 396x 1 845 0 048 咪鮮胺 ED6 y 2 350 x 3 926 0 021 ED8 y 1 806x 2 668 0 033 ED9 y 0 947x 2 492 0 002 丙硫菌唑 ED6 y 1 693x 0 285 0 679 ED8 y 2 912x 0 687 0 581 ED9 y 2 781x 1 344 0 329 吡唑醚菌酯 ED6 y 2 070 x 2 528 0 060 ED8 y 1 029x 1 574 0 030 ED9 y 0 892x 1 888 0 008 表 4 發(fā)病和健康茄子植株不同部位間座殼菌相對(duì)豐度 樣品 上部 中部 下部 健康 0 0 004 3 0 004 5 發(fā)病 1 327 6 0 076 0 0 062 4 道是柑橘相關(guān)的內(nèi)生真菌 此后發(fā)現(xiàn)其是多種作物 的病原菌 22 通過(guò)對(duì)健康和發(fā)病茄子植株真菌結(jié)構(gòu)多樣性 分析發(fā)現(xiàn) 發(fā)病植株分枝處的物種多樣性高于健康 分枝處 而在其他部位的物種多樣性小于健康植 株 茄子褐紋病病菌間座殼菌 大量存在于發(fā)病植株分枝處 少量存在于嫁接口和植株主 干部位 而健康植株分枝處無(wú) 間座殼菌分布 嫁接口和主干 存在極少間座殼菌分布 Xu 等 23 研究結(jié)果表明 引起茄 子植株枯萎的部分原因是 Diaporthe 感染地上組織 因 此 茄子褐紋病可能是由間座 殼菌侵染上部枝條引起的 因 研究采集的樣品數(shù)量有限 健 康和發(fā)病茄子植株真菌結(jié)構(gòu) 多樣性結(jié)果還需進(jìn)一步驗(yàn)證 研究采用菌絲生長(zhǎng)抑制 法測(cè)定了 4 種藥劑對(duì)間座殼 屬病原菌的活性 發(fā)現(xiàn) 4 種藥 劑對(duì)間座殼屬病原菌均有抑 制作用 其中以咪鮮胺的抑制 效果最好 此前對(duì)茄子褐紋病 防治藥劑進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定 發(fā)現(xiàn) 6 種殺菌劑中以咪鮮胺 的抑制作用最強(qiáng) 與本研究結(jié) 果基本一致 對(duì)于防治間座殼 屬病原菌的藥劑 本研究?jī)H在 室內(nèi)進(jìn)行測(cè)定 田間防治情況 還有待進(jìn)一步試驗(yàn) 參考文獻(xiàn) 1 惠志明 張樹(shù)根 鄧曉梅 等 不 同類型茄子果實(shí)主要營(yíng)養(yǎng)成分 和氨基酸含量分析 J 中國(guó)蔬菜 2024 3 97 103 2 張雅 鄭積榮 何建仙 等 杭茄 系列茄子品種的雜交制種技術(shù) J 中國(guó)蔬菜 2002 1 47 3 李濤 黎振興 李植良 等 茄子 褐紋病的研究現(xiàn)狀與展望 J 中 國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào) 2015 31 5 108 115 4 吳仁鋒 楊紹麗 楊德枝 茄子褐紋病病原鑒定及其生物 學(xué)特性研究 J 中國(guó)蔬菜 2013 4 80 85 5 Shu C Chen J Huang H et al First report of Phomopsis longicolla causing stem canker of eggplant in Guangdong China J Plant Disease 2014 3 98 426 圖 5 基于 ITS 和 TEF1 串聯(lián)構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù) 注 數(shù)值表示自展值 下方的標(biāo)尺表示遺傳距離 2025 8 26 Study on Pathogen Species and Fungicide Sensitivity of Eggplant Brown Rot Disease FENG Ji 1 ZHANG Chuanqing 1 WANG Hong 1 2 1 College of Advanced Agricultural Sciences Zhejiang A 2 Hangzhou Academy of Agricultural Sciences Abstract Eggplant brown rot is one of the main diseases of eggplant which seriously affects the yield and quality of eggplant Early studies have reported that the pathogen of eggplant brown rot is mainly Phomopsis vexans In order to clarify the pathogen species the pathogen was isolated and identified the diseased and healthy eggplant samples were analyzed through ITS amplicon sequencing The results showed that the isolated pathogens were identified as Diaporthe vexans D sojae and D unshiuensis by morphological and molecular biological methods The microbial community analysis of healthy and diseased plants showed that the occurrence level of eggplant brown rot disease was related to the abundance of D spp The sensitivity of the above three pathogens to four fungicides was determined by mycelial growth rate method The results indicated that tebuconazole prochloraz prothioconazole and pyraclostrobin had obvious inhibitory effects on the colony growth among which prochloraz showed the highest inhibitory activity with an average EC 50 value of 0 019 g mL The results provide a basis for the prevention and control of eggplant brown rot disease Key words Eggplant brown rot Diaporthe Pathogen identification Fungicide sensitivity 6 Aumentado H D Balendres M A et al Novel species and new records of Diaporthe causing eggplant leaf and fruit blight in the Philippines J Mycol Progress 2024 23 1 23 7 衡周 孫小晴 黃俊霖 等 茄子褐紋病菌的分離鑒定及產(chǎn) 孢條件的優(yōu)化 J 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2020 47 6 56 62 8 任長(zhǎng)清 茄子褐紋病及蚜蟲(chóng)的防治 J 農(nóng)業(yè)與技術(shù) 2016 36 14 107 9 張超 王玉梓 王照琪 等 檳榔間座殼菌葉斑病病原鑒定 及生物學(xué)特性 J 熱帶生物學(xué)報(bào) 2025 16 1 79 86 10 張蕊 楊石有 劉曉妹 等 芒果炭疽菌致病力室內(nèi)快速 測(cè)定方法研究 J 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué) 2016 8 51 54 11 王先洪 姜佳琦 洪霓 等 貴州梨芽枯間座殼菌屬Diaporthe 的種類 J 菌物學(xué)報(bào) 2022 41 8 1 151 1 164 12 賴多 王德林 周?chē)?guó)昌 等 余甘子斑點(diǎn)病病原菌鑒定 生 物學(xué)特性及防治藥劑篩選 J 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 2024 55 2 479 488 13 White T J Bruns T Lee S J Amplification and direct sequencing of fungal ribosomal RNA genes for phylogenetics M PCR protocols A guide to methods and applications 1990 315 322 14 Carbone I Kohn L M A method for designing primer sets for speciation studies in filamentous ascomycetes J Mycologia 1999 91 3 553 556 15 Callahan B J Mcmurdie P J Rosen M J et al DADA2 High resolution sample inference from Illumina amplicon data J Nature Methods 2016 13 7 581 583 16 朱璨 江山市柑橘病蟲(chóng)害調(diào)查及黑點(diǎn)病的發(fā)生與防治 D 杭州 浙江農(nóng)林大學(xué) 2023 17 Norphanphoun C Gentekaki E Hongsanan S et al Diaporthe Formalizing the species group concept J Mycosphere 2022 13 1 752 819 18 李媛 石凌波 費(fèi)諾亞 等 藍(lán)莓間座殼莖潰瘍病病原鑒 定及生物學(xué)特性研究 J 植物保護(hù) 2017 43 1 89 94 19 Zhao X L Li K N Zheng S j et al Diaporthe diversity and pathogenicity revealed from a broad survey of soybean stem blight in China J Plant Disease 2022 106 2 892 2 903 20 Mahadevakumar S Janardhana G R Leaf blight and fruit rot disease of brinjal caused by Diaporthe vexans Phomopsis vexans in six agro ecological regions of south west India J Plant Pathology Quarantine 2016 6 1 5 12 21 Xiao Y S Zou M Y Zhou X et al First report of postharvest fruit brown rot disease on navel orange caused by Diaporthe sojae in China J Plant Disease 2023 3 107 948 22 Huang F Udayanga D Wang X et al Endophytic Diaporthe associated with citrus A phylogenetic reassessment with seven new species from China J Fungal Biology 2015 119 5 331 347 23 Xu X Minja R Kizito E B et al Amplicon sequencing identified a putative pathogen Macrophomina phaseolina causing wilt in African eggplant Solanum aethiopicum grown in Tanzania and Uganda J Frontiers in Agronomy 2024 5 1 300 324 2025 8 27