四川省草莓灰霉病菌對咯菌腈的抗性測定及其機制.pdf

<p>摘要： 【目的】灰霉病是草莓生產(chǎn)過程中的一種重要病害，嚴重影響了其產(chǎn)量和品質。論文旨在明確四川省草莓灰霉病菌對咯菌腈的抗性頻率以及抗性機制，為草莓灰霉病的藥劑防治提供理論依據(jù)?！痉椒ā?0162017年從四川成都、德陽、眉山、樂山及雅安等地采集草莓灰霉病樣本，并分離純化得到 188 株草莓灰霉病菌菌株。采用區(qū)分計量法測定 188 株灰霉病菌對咯菌腈的敏感性水平，采用菌絲生長速率抑制法測定咯菌腈對代表性菌株的毒力和滲透壓敏感性，采用甘油銅比色法測定經(jīng)咯菌腈處理的抗性菌株和敏感菌株甘油含量，采用分段測序對抗性菌株和敏感菌株型組氨酸激酶基因 BOS1（BC1G_00374）擴增測序，采用 Swissmodle 和 I-TASSER 預測和評價突變對 BOS1 的結構影響?！窘Y果】188 株灰霉病菌菌株中有 8 株表現(xiàn)為高抗，9 株為中抗，43 株為低抗，其余表現(xiàn)為敏感；咯菌腈對代表性菌株的 EC 50介于 0.030.62 g·mL-1，代表性菌株的抗性倍數(shù)范圍為 2.245.9。NaCl濃度在 1.2510 g ·L-1可刺激敏感菌株生長，濃度在 1.2520 g ·L-1范圍可刺激抗性菌株生長，但40 g ·L-1時則抑制菌絲生長，尤其對抗性菌株，抗性越高抑制作用越強；在正常條件下各代表性菌株甘油含量介于 0.00250.0148 g·mL-1，且菌株的甘油含量與咯菌腈抗性沒有明顯的關聯(lián)性，但在使用咯菌腈處理(0.1 g·mL-1)抗性菌株和敏感菌株后，甘油含量均上升，且抗性菌株甘油含量上升幅度明顯低于敏感菌株。低抗菌株 YAHY-13、CDCZ-2 以及中抗菌株 CDCZ-42 在 TAR 和 HAMP 區(qū)域均發(fā)生突變，中抗菌株 CDCZ-20 和高抗菌株 MYFC-10、CDCZ-43 在 TAR 和 REC 區(qū)域均有突變，但 CDCZ-20 菌株在 TAR 區(qū)域位點是 I365N，而兩株高抗菌株在 TAR 區(qū)域位點是 I365S。不同突變位置對 BOS1 區(qū)域結構有不同程度的影響，其中 F127S、I365N、I365S、V1136I、A1259T 均處于 BOS1 區(qū)域結構的無規(guī)則卷曲，但 TAR 區(qū)域 I365N 和 I365S 使區(qū)域結構無規(guī)則卷曲發(fā)生整體偏移?！窘Y論】四川省已有部分地區(qū)草莓灰霉病菌對咯菌腈產(chǎn)生了抗性；相比敏感菌株，田間抗性菌株對滲透壓的耐受能力增加，但當濃度超過耐受范圍后對滲透脅迫高度敏感，藥劑脅迫下田間抗性菌株甘油含量增加量顯著小于敏感菌株；組氨酸激酶 BOS1 突變的位置和方式與灰霉病菌菌株對咯菌腈的抗性水平存在必然聯(lián)系。</p>