蝴蝶蘭PhNAC1基因序列分析及對(duì)低溫脅迫的響應(yīng).pdf

<p>NAC轉(zhuǎn)錄因子參與植物生長(zhǎng)發(fā)育的諸多過(guò)程,在植物逆境應(yīng)答中發(fā)揮重要的作用。本研究以蝴蝶蘭的葉片為材料,運(yùn)用RT-PCR及RACE技術(shù)克隆得到一條蝴蝶蘭的NAC轉(zhuǎn)錄因子基因完整的cDNA序列,命名為PhNAC1(GenBank登錄號(hào)MF797909)。PhNAC1基因cDNA序列全長(zhǎng)1442 bp,ORF全長(zhǎng)942 bp,編碼313個(gè)氨基酸。預(yù)測(cè)其蛋白分子量35.22 kDa,等電點(diǎn)6.95,屬于穩(wěn)定親水性蛋白。二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)表明,無(wú)規(guī)則卷曲和延伸鏈為該蛋白的主要結(jié)構(gòu)元件,與三級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)結(jié)果基本相符。PhNAC1編碼的氨基酸序列與其他已登錄的蘭科植物NAC蛋白進(jìn)行同源序列比對(duì),表明與小蘭嶼蝴蝶蘭(XP0205763790)親緣關(guān)系較近,序列一致性達(dá)97%,其次為鐵皮石斛(XP020695081),一致性為84%。實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析表明,PhNAC1基因在營(yíng)養(yǎng)器官和生殖器官中均有表達(dá),在蕊柱中的表達(dá)量最高。在11/6低溫條件下,PhNAC1基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平在前5天隨著處理時(shí)間逐漸升高,第7天下降;在4低溫條件下,PhNAC1基因的表達(dá)水平在處理0.5 h表達(dá)量有所下降,1 h后表達(dá)量上升至對(duì)照水平,之后無(wú)明顯變化,在處理24 h至48 h又逐漸升高,推測(cè)PhNAC1基因參與蝴蝶蘭低溫脅迫響應(yīng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為研究NAC轉(zhuǎn)錄因子在蝴蝶蘭低溫脅迫響應(yīng)中的分子調(diào)控機(jī)理提供理論基礎(chǔ)。</p>