芽孢桿菌NH_8對(duì)番茄根結(jié)線蟲病的生防效果.pdf

李德全 鄧自發(fā) 曹云英 等 芽孢桿菌 NH 8 對(duì)番茄根結(jié)線蟲病的生防效果 J 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2020 48 8 108 110 doi 10 15889 j issn 1002 1302 2020 08 019 芽孢桿菌 NH 8 對(duì)番茄根結(jié)線蟲病的生防效果 李德全 鄧自發(fā) 曹云英 孫利軍 南通大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部南方平原玉米科學(xué)觀測(cè)實(shí)驗(yàn)站 江蘇南通 226001 摘要 芽孢桿菌 NH 8 對(duì)多種植物病害均有較好的防治效果 為進(jìn)一步驗(yàn)證其田間防治效果 進(jìn)行生防菌劑防 治番茄根結(jié)線蟲病的田間試驗(yàn) 結(jié)果表明 設(shè)施大棚中使用生防菌劑 NH 8 能有效防治番茄根結(jié)線蟲病 校正防效 達(dá)到 81 18 同時(shí)對(duì)番茄還有一定的促生作用 菌劑處理 20 d 后 番茄苗株高 鮮質(zhì)量和干質(zhì)量分別比清水對(duì)照增 加 29 51 49 94 55 14 關(guān)鍵詞 芽孢桿菌 番茄 根結(jié)線蟲 防治效果 生防菌劑 中圖分類號(hào) S436 412 1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1002 1302 2020 08 0108 03 收稿日期 2019 07 20 基金項(xiàng)目 國(guó)家自然科學(xué)基金 編號(hào) 81272378 南通市應(yīng)用基礎(chǔ)研 究 編號(hào) MS12015089 南通大學(xué)重點(diǎn)項(xiàng)目 編號(hào) 03080227 作者簡(jiǎn)介 李德全 1975 男 江蘇徐州人 博士 副教授 主要從事 生物防治和抗性生理研究 E mail lidequan ntu edu cn 根結(jié)線蟲作為一類重要的植物病原物 分布范 圍十分廣泛 包括熱帶和亞熱帶地區(qū) 危害比較嚴(yán) 重的南方根結(jié)線蟲 目前報(bào)道的接近 80 種 1 根結(jié) 線蟲在我國(guó)大多數(shù)省份均有發(fā)現(xiàn) 可侵染多種農(nóng)作 物 致使寄主常年減產(chǎn) 15 25 有時(shí)高達(dá) 75 以上 嚴(yán)重影響了糧食 蔬菜 果樹 花卉等作物的 生產(chǎn)和出口創(chuàng)匯 蔬菜中尤以種植面積較大的番 茄 黃瓜等受害最重 2 對(duì)于根結(jié)線蟲病的防治 傳統(tǒng)以化學(xué)藥劑為主 但化學(xué)殺線蟲劑對(duì)環(huán)境污 染嚴(yán)重 使用過(guò)程中對(duì)人 畜也不安全 因此 生物 防治方法日益受到重視 其中應(yīng)用微生物農(nóng)藥進(jìn) 行根結(jié)線蟲防治的研究較多 微生物農(nóng)藥是指由 微生物及其代謝產(chǎn)物加工而成的具有殺蟲 殺菌 除草或調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)的具有農(nóng)藥活性的物質(zhì) 包括 農(nóng)用抗生素和活體微生物農(nóng)藥 是生物防治的物質(zhì) 基礎(chǔ)和重要手段 3 7 目前 生產(chǎn)中已有一些芽孢 桿菌用于根結(jié)線蟲防治 效果良好 阿維菌素是由 灰色鏈霉菌發(fā)酵產(chǎn)生的一種新型抗生素 對(duì)根結(jié)線 蟲病具有良好的防效 目前 防治線蟲的生防資源 主要有真菌 細(xì)菌等 防治線蟲的細(xì)菌主要有芽孢 桿菌和假單胞菌 8 10 江蘇省南通市是保護(hù)地蔬菜種植的重要基地 但近年來(lái) 根結(jié)線蟲危害日益嚴(yán)重 給設(shè)施蔬菜生 產(chǎn)造成很大損失 嚴(yán)重影響本地農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā) 展 為解決生產(chǎn)中根結(jié)線蟲病的防治問(wèn)題 近年來(lái) 有一些關(guān)于中低毒藥劑和生防菌防治根結(jié)線蟲病 方面的試驗(yàn)報(bào)道 11 為保護(hù)本地蔬菜免受根結(jié)線 蟲的危害 減輕根結(jié)線蟲對(duì)蔬菜產(chǎn)量的損失 南通 大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室開展了根結(jié)線蟲生 防菌株的篩選應(yīng)用 篩選到的芽孢桿菌 NH 8 對(duì) 多種植物病害有較好的防治效果 為進(jìn)一步驗(yàn)證 其田間防治效果 進(jìn)行生防菌劑防治番茄根結(jié)線蟲 病田間效果試驗(yàn) 1 材料與方法 1 1 供試材料 1 1 1 供試菌株 NH 8 菌株由筆者所在實(shí)驗(yàn)室 從南通市近海海藻中分離獲得 將 NH 8 菌株在 28 130 r min 條件下振蕩培養(yǎng) 48 h 的菌液 用無(wú)菌 水配成 1 0 10 10 CFU mL 的菌懸液 以備灌根使用 1 1 2 供試作物 供試番茄品種為蘇粉 8 號(hào) 1 2 試驗(yàn)地點(diǎn) 田間試驗(yàn)選取在江蘇省海門市正余鎮(zhèn)昌盛村 以及如皋市石莊鎮(zhèn)楊莊村設(shè)施番茄田塊進(jìn)行 室內(nèi) 試驗(yàn)在南通大學(xué)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行 試驗(yàn) 土壤類型為沙土兩合土 肥力中等偏上 有機(jī)質(zhì)含 量為 14 g kg 在定植時(shí)采用處理藥劑進(jìn)行灌根 1 3 試驗(yàn)方法 1 3 1 生防菌劑處理番茄 棚內(nèi)面積為 400 m 2 50 m 8 m 設(shè) 3 個(gè)處理 每個(gè)處理 3 次重復(fù) 共 設(shè)置 9 個(gè)小區(qū) 采用隨機(jī)區(qū)組排列 每個(gè)小區(qū) 48 m 2 左右 各小區(qū)間設(shè)置 2 行隔離區(qū) 以防止藥液 互相干擾 于移栽前整地時(shí)施用充分腐熟的有機(jī) 801 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2020 年第 48 卷第 8 期 肥 番茄移栽時(shí)采用 NH 8 發(fā)酵液灌根處理 每株 灌根 250 mL 并在移栽 10 20 d 后分別用藥劑處理 1 次 以清水處理為對(duì)照 1 3 2 生防菌對(duì)番茄生長(zhǎng)作用的影響 番茄移栽 后 20 d 隨機(jī)抽取移栽好的番茄苗 采用 5 點(diǎn)取樣 法 每點(diǎn)取番茄苗 3 株 調(diào)查地上部分植株的鮮質(zhì)量 和地下部根質(zhì)量 將番茄植株用自來(lái)水洗凈晾干 用直尺測(cè)量株高 游標(biāo)卡尺測(cè)量主莖粗度 電子秤 稱量植株鮮質(zhì)量和干質(zhì)量 稱量干質(zhì)量時(shí) 先將番 茄植株在烘箱中 45 烘干 每個(gè)處理重復(fù) 3 次 1 4 病害調(diào)查與統(tǒng)計(jì)分析 1 4 1 病害調(diào)查 于移栽后 60 d 調(diào)查根結(jié)線蟲的 危害程度 以及各處理的病情指數(shù)和病株防效 按 照 Luc 等提出的病級(jí)標(biāo)準(zhǔn)記錄病級(jí)數(shù) 12 計(jì)算病害 嚴(yán)重度和防效 病害嚴(yán)重度和防效的計(jì)算公式為 病害嚴(yán)重度 病植株數(shù) 病級(jí)數(shù) 總植 株數(shù) 最高病級(jí)數(shù) 100 防效 對(duì)照病害嚴(yán)重度 處理病害嚴(yán)重度 對(duì)照病害嚴(yán)重度 100 校正防效用 Henderson Tdlton 公式計(jì)算 校 正防治效果 1 處理區(qū)藥后病情指數(shù) 對(duì)照區(qū) 藥前病情指數(shù) 處理區(qū)藥前病情指數(shù) 對(duì)照區(qū)藥 后病情指數(shù) 100 1 4 2 數(shù)據(jù)分析 利用 DPS 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì) 分析 采用 Duncan s 新復(fù)極差法對(duì)各個(gè)處理進(jìn)行顯 著性驗(yàn)證 2 結(jié)果與分析 2 1 生防菌劑 NH 8 對(duì)番茄的促生作用效果 NH 8 菌株對(duì)番茄生長(zhǎng)影響的測(cè)定結(jié)果 表 1 顯示 菌株發(fā)酵液處理對(duì)番茄生長(zhǎng)具有顯著的促進(jìn) 作用 其中 菌株發(fā)酵液處理 20 d 后 苗株高 鮮質(zhì) 量和干質(zhì)量分別比清水對(duì)照增加 28 95 49 94 55 14 表 1 NH 8 菌株對(duì)番茄生長(zhǎng) 20 d 時(shí)的影響 處理 株高 cm 主莖粗 cm 鮮質(zhì)量 g 株 干質(zhì)量 g 株 NH 8 菌株發(fā)酵液 31 67a 1 27a 12 67a 3 32a 清水 24 56b 0 75b 8 45b 2 14b 注 Duncan s 新復(fù)極差法多重比較 不同小寫字母表示 5 的顯 著水平 相同字母表示差異不顯著 2 2 生防菌劑 NH 8 對(duì)番茄根結(jié)線蟲病的防治 效果 試驗(yàn)地區(qū)連續(xù) 6 年種植番茄的大棚里 根結(jié)線 蟲及腐霉 疫霉等多種病原物引起的根部病害非常 嚴(yán)重 在此進(jìn)行的田間生物防治 試驗(yàn)結(jié)果表明 生防菌劑 NH 8 對(duì)番茄根結(jié)線蟲病有著良好的防 治效果 根系增多壯實(shí)且相對(duì)光滑 根結(jié)明顯減少 圖 1 方差分析結(jié)果表明 生防菌劑 NH 8 的校 正防效達(dá)到 81 18 有顯著提高 表 2 901 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2020 年第 48 卷第 8 期 表 2 生防菌劑 NH 8 對(duì)番茄根結(jié)線蟲病的防治效果 處理 施藥前 第 2 次藥后 60 d 病情指數(shù) 病穴率 病情指數(shù) 病穴防效 校正防效 生防菌劑 NH 8 6 33 16 67 4 67 61 97 81 18 aC 清水對(duì)照 6 20 17 00 注 aC 表示 5 的顯著水平 3 討論 根結(jié)線蟲病是影響番茄生產(chǎn)的重要病害之一 目前防治主要利用殺線蟲劑 但應(yīng)用化學(xué)殺線蟲劑 會(huì)嚴(yán)重影響人畜健康 對(duì)環(huán)境不友好 近年來(lái) 隨 著人們對(duì)健康的重視和環(huán)保意識(shí)的增強(qiáng) 根結(jié)線蟲 病的生物防治也越發(fā)受到重視 開發(fā)利用生防因 子來(lái)防治根結(jié)線蟲病害 一直是人們關(guān)注的熱點(diǎn)問(wèn) 題 13 14 Sharond 等研究發(fā)現(xiàn) 哈茨木霉對(duì)爪哇根 結(jié)線蟲病具有很好的防治效果 并對(duì)植株的生長(zhǎng)有 顯著促進(jìn)作用 15 oberts 等研究發(fā)現(xiàn) 綠木霉菌株 GL3 對(duì)南方根結(jié)線蟲卵的孵化產(chǎn)生很好的抑制作用 同時(shí)對(duì)立枯絲核菌和疫霉均有較好的防治效果 16 Becker 等研究發(fā)現(xiàn) 假單胞菌和芽孢桿菌的一些菌株 能殺滅根結(jié)線蟲的活性 具有較好的防治效果 17 枯草芽孢桿菌 Bacillus subtilis 在自然界中廣 泛存在 同時(shí)還是植物體內(nèi)常見的內(nèi)生細(xì)菌 對(duì)人 畜無(wú)毒害 對(duì)環(huán)境無(wú)污染 具有顯著的抗菌活性和 極強(qiáng)的抗逆能力 同時(shí) 枯草芽孢桿菌生長(zhǎng)快 容 易培養(yǎng) 本試驗(yàn)利用的枯草芽孢桿菌 NH 8 菌株 對(duì)多種植物病原生物具有具有較強(qiáng)的拮抗性能 在 溫室試驗(yàn)中 對(duì)南方根結(jié)線蟲的二齡幼蟲也有很好 的防治效果 表現(xiàn)出較強(qiáng)的生防性能 18 本試驗(yàn)結(jié) 果進(jìn)一步表明 生防菌劑 NH 8 對(duì)番茄根結(jié)線蟲有 著良好的防治效果 使番茄根系粗壯且相對(duì)光滑 根結(jié)明顯減少 校正防效達(dá)到 81 18 同時(shí)試驗(yàn) 結(jié)果還表明 該生防菌劑對(duì)供試植株具有很好的促 生作用 由于試驗(yàn)所選用田塊長(zhǎng)期連作發(fā)病較重 在移栽初期用藥進(jìn)行灌根處理 可有效抑制土壤中 根結(jié)線蟲低齡幼蟲進(jìn)入番茄根內(nèi) 防效較高 但隨 著生長(zhǎng)期的延長(zhǎng) 藥劑藥效逐漸降低 土壤中根結(jié) 線蟲密度增大 番茄根結(jié)線蟲病病情加重 如果在 番茄不同生長(zhǎng)期進(jìn)行施藥處理 防治效果或許更 好 其結(jié)果有待進(jìn)一步試驗(yàn)驗(yàn)證 同時(shí)試驗(yàn)沒(méi)有在 不同番茄品種間進(jìn)行防病促生作用的對(duì)比 有待進(jìn) 一步研究 參考文獻(xiàn) 1 丁國(guó)春 付 鵬 李紅梅 等 枯草芽孢桿菌 A 11 菌株對(duì)南方根 結(jié)線蟲的生物 J 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